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第一章 酶学与酶工程 第一节 酶工程概述 酶工程定义： 通过预先设计，经人工操作而获得大量所需的酶，并利用各种方法使酶发挥最大的催化功能。 酶学与酶工程研究简史 1.1783 意大利 斯巴兰让 胃具有化学消化的功能 2.1833 payen person 麦芽的水抽提物→酒精沉淀→淀粉水解（淀粉酶制剂） 3.1878 德国 kuhne Enzyme 4.1878 德国 Buchner兄弟 酵母无细胞提取液（石英砂）→酒精发酵 5.1926 美 Sumner 脲酶结晶（纯品） 酶是蛋白质 6.各种酶的发现 酶工程： (1894 日本 高峰让吉 曲米霉→淀粉酶（用于工业上） 固体发酵 (1908 德国 胰酶→皮革软化（工业） (1949 液体的深层发酵（培养）技术 7.1950s 固定化酶 60s 固定化细胞 1953 聚氨苯乙烯树脂 淀粉酶等 1969 日本 千田一郎 工业化固定氨基酸酰化酶（DL-氨基酸拆分） 80s以后出现新技术 酶工程的研究内容 1.1971第一届国际酶工程会议 研究内容：酶的生产，纯化，固定化，反应器 2.21世纪酶工程发展主题 新酶：研究与开发 酶的优化生产 酶的高效应用（固定化，化学修饰，非水酶学） 新酶 核酶 人工酶：人工合成的非蛋白质类酶 抗体酶： 抗体通过化学修饰或者突变或重组 催化中心 酶 结合中心 催化中心 端粒酶：延长端粒 端粒复制时会变短 复制50-60次 生殖细胞 干细胞 癌细胞（端粒活性很高） 极性环境微生物新酶 Taq 聚合酶（嗜热） 不可培养微生物新酶 在常规条件下，无法得到的微生物的纯化培养体（99%-95%不可培养） 杂交酶 不同结构域串联 酶的优化生产 优化的培养基配方 优化培养条件 优化分离培养条件 酶的高效应用 1.固定化 化学修饰 非水酶学 2.生物酶 食品饮料行业 其他（各占1/3） 丹麦 诺维信（Novozyme）（酶，微生物制剂）←Novo Nordisk 诺和诺德（前体） 美国 杰能科（Genencor） 荷兰 帝斯曼（DSM） 第二节 酶分类 组成 结构特点及作用机制 酶分类 氧 转 水 裂 异 合 核 命名： 底物名称+ase 习惯命名 来源：胰酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 功能：溶菌酶 系统命名：底物+反应类型 酶的国际统一编号： Ec 3 . 4 . 21 . 4 ↓ ↓ ↓ ↓ 大类 亚类 亚亚类 序号（发现的先后次序） 酶的组成 酶蛋白：结合为主 全酶 辅酶：疏松（非共价） 超滤或透析 辅因子：催化为主 辅基：与酶蛋白结合牢固（共价结合）→不能分开 酶蛋白的结构蛋白 1.球蛋白 2.球蛋白表面至少含有一个凹陷的空穴，空穴一般为疏水环境 3.亲水氨基酸趋向外侧，疏水趋向内侧（内侧疏水核，外侧亲水核） 酶的三维构想测定 X晶体衍射 3/4 核磁共振 1/4 作用机制 酶作用专一性假说 1.锁钥学说 1894 Fisher E，S 局限：无法解释可逆反应 诱导契合学说 1958 Koshland E,S 当酶分子与底物分子相互接近时，E受到S的诱导而发生了有利于底物结合的构 象，从而相互契合进行反应。 3.三点附着学说：解释了立体异构专一性 酶的催化机理 1.广义的酸碱催化 广义酸：能够提供质子 E-COOH COO-+H+ 广义碱：能够接受电子 -COO- 2.共价催化 亲核基团：提供电子 相当于还原剂 亲电基团：接受电子 相当于氧化剂 酶分子主要以亲核基团为主 -COOH -NH2 -SH 组氨酸-咪唑基(一般PH下，既可以做广义酸，又可以作广义碱，亲核基团强) 亲电：H+ Fe2+ Mn2+ 邻近及定向效应 变形和张力（主要是共价催化） 酶的