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百合多糖的超声波提取条件的研究.doc
百合多糖的超声波提取条件的研究
摘 要:以百合为原料制备百合多糖,研究百合多糖的超声波提取条件。取5.0 g百合碎片,超声波提取,滤去饱和残渣,合并提取液,减压浓缩至原溶液的1/4,加入5倍量无水乙醇沉淀,得到多糖粗品。将多糖粗品溶解,采用Sevag法除去蛋白质,得到百合多糖。以苯酚-硫酸法测定百合多糖含量。在超声波功率500 w时,提取条件为提取时间30 min,料液比1:10,提取次数1次,得到的百合多糖含量最高。通过对百合多糖的超声波提取条件的研究,为百合多糖的进一步开发利用提供了实验依据和有价值的参考。
关键词:百合 多糖 超声波 提取条件
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2014)12(b)-0063-02
百合既是珍贵蔬菜,又是著名的观赏球根类花卉,更是药食兼有的滋补佳品。现代医学研究表明,百合为常用中药,性味甘寒,具有养阴清肺、清心安神、补中益气之功效。百合多糖与其他植物多糖一样,具有较为广泛的药理作用,主要包括抗氧化、抗肿瘤、降血糖与免疫调节[1-13]。为促进百合多糖的进一步开发和应用,该文研究了百合多糖的超声波提取条件,并对超声波提取百合多糖的最优化工艺条件进行了研究。
1 材料与方法
1.1 原材料与主要试剂
百合产自湖南,符合2010年药典。切小片。苯酚,浓硫酸(98%),正丁醇,氯仿,所用水为三级纯水。
1.2 实验方法
1.2.1 超声波提取
取5.0 g百合碎片,加入蒸馏水,超声波提取,滤去饱和残渣,合并提取液,减压浓缩至原溶液的1/4,加入5倍量无水乙醇沉淀,得到多糖粗品。将多糖粗品溶解,采用 Sevag法[14]除去蛋白质,得到百合多糖。采用苯酚-硫酸[15]法测定多糖含量和得率。
1.2.2 苯酚-硫酸测定法
精密量取供试品溶液1mL,置具塞试管中,加水1.0mL,精密加入5%苯酚溶液1mL摇匀,迅速精密加入硫酸5mL,摇匀,放置10 min,置40 ℃水浴中保温18 min,取出后迅速冷却至试温,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在490 nm的波长处测定吸光度。以Y=0.5423X+0.0154计算[15]。
2 超声波提取工艺及优化
使用超声波细胞破碎仪进行超声波提取,超声波提取功率为500 w。
2.2.1 提取时间对多糖得率的影响
超声波功率为500 w,称取百合小片5.0 g,加入蒸馏水50 mL,料液比1:10,分别提取 10、20、30、40、50、60 min,测定多糖得率,结果如表1和图1。
由图1可见,在0~30 min,多糖的得率随时间的增加而增加,这是由于超声时间较短时,溶出物较少,多糖含量较低;随时间增加,细胞膜破碎程度增强,溶出物增多,多糖得率也就增高。
当时间大于30 min时,有效成分已完全溶出,细胞壁进―步破碎,杂质相应增加,多糖得率呈现下降趋势。
2.2.2 料液比对多糖得率的影响
超声波功率500 w,称取百合小片5.0 g,分别加入30 mL,40 mL,50 mL,60 mL,75 mL,100 mL蒸馏水,提取30 min,合并提取液,得到百合多糖,测定其含量和得率。结果如表2和图2。
由图2可见,当提取液固比在6∶1~10∶1时,多糖的得率随料液比的增加而增加。随后,得率随液固比的增加而下降。在液固比为10∶1时得率最高,为2.9773%。可知,溶剂量过小时多糖不能完全溶出;溶剂量稍大时,超声波辐射可能被溶剂大量吸收,不能完全作用于物料,从而影响多糖得率。而当溶剂量为1:20时,多糖得率又有大幅上升,可能此时多糖溶出较完全。
2.2.3 提取次数对多糖得率的影响
在超声波功率500 w时,提取时间30 min,料液比1:10条件下,称取百合小片5.0 g,研究提取次数对多糖得率的影响,见表3和图3。
3 结语
百合多糖超声波提取的影响因素很多,如料液比、提取时间、提取次数、提取温度、超声波频率,但由于该实验室超声波提取设备的可调节因素的限制,该研究在超声波功率固定为500 w,选取了影响百合多糖超声波提取的3个主要影响因素进行试验,通过单因素实验初步研究了超声波功率500 w时,百合多糖超声波提取的条件,确定了超声波功率500 w时,最优条件为提取时间30 min,料液比1:10,提取次数1次,在此条件下,百合多糖得率为2.9773%。为百合多糖的进一步开发利用提供了实验依据和有价值的参考。
参考文献
[1] 中国科学院植物研究所.中国经济植物志(上册)[M].北京:北京出版社,1961:629.
[2] 唐传核,彭志英.
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