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桤叶唐棣中花色苷提取工艺的研究 　　摘要：以桤叶唐棣（Amelanchier alnifolia）为试验材料，以乙醇溶液为提取剂应用超声辅助法提取桤叶唐棣中花色苷，采用正交试验分析了液料比、超声功率、超声时间3个因素对花色苷提取含量的影响，并优化了提取工艺。结果表明，超声辅助提取桤叶唐棣中花色苷的最佳工艺条件为液料比15∶1（mg/mL），超声功率360 W，超声时间20 min，在此条件下，花色苷含量可达260.45 mg/100 g。 　　关键词：桤叶唐棣（Amelanchier alnifolia）；超声提取；花色苷；正交试验 　　中图分类号：S663.9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2864-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.038 　　桤叶唐棣（Amelanchier alnifolia）是蔷薇科唐棣属一种落叶小乔木或灌木，侧根发达，耐旱性强、具有较强的水土保持功能，其果实为梨果状浆果，营养成分丰富，钙含量居百果之首[1]，原产于加拿大Praiess地区[2]。吉林省北华大学对唐棣的引种驯化已经成功，进行了比较系统的研究[3]。唐棣中有多种功能性成分，其中花色苷和果胶的含量比较丰富，花色苷对人体的某些疾病具有预防、治疗等药理作用和保健功能[4]；果胶是膳食纤维的主要成分，具有良好的抗腹泻、抗癌、治疗糖尿病和减肥等功效，在食品工业中广泛应用。 　　花色苷的提取方法主要有溶剂萃取法、超临界CO2提取法、超声波辅助提取法和酶法等，其中溶剂萃取法是最常用的提取方法，超声波辅助提取法是一种新兴的提取方法[5，6]，此外还有微波辅助提取法、液态静高压法辅助提取法、高压脉冲电场辅助提取等。传统的水提取法和溶剂提取法应用普遍[7]，但新兴的超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界CO2提取法、酶法提取等方法已得到广泛关注与研究[8]。目前，关于花色苷的研究鲜见报道，本试验利用超声波萃取方法对桤叶唐棣中的花色苷进行提取，并对提取过程中的各因素采用正交试验进行优化，为规模化生产花色苷提供有价值的工艺参数。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　桤叶唐棣果实，采摘于蛟河实验林场；无水乙醇、盐酸、氯化钾均为国产分析纯；普通电子天平（JT502N型）、数显恒温水浴锅（HH-2型），金坛市科析仪器有限公司；可见分光光度计（722N型），上海佑科仪器仪表有限公司；电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9243B5-III型），上海新苗医疗器械制造有限公司。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 花色苷提取 选用新鲜成熟、果实饱满、机械损伤少的桤叶唐棣果实，用清水洗净，置于冰箱中冷冻，待冻至坚硬，粉碎机粉碎后用培养皿盛装覆膜放置于冻干机冻干24 h，取出备用。试验时每组称量2 g。用60%乙醇作为溶剂浸提3次，每次30 min，用真空抽滤去残渣，旋转蒸发仪进行浓缩。 　　1.2.2 光谱扫描确定测量最佳波长 光谱扫描范围为200～700 nm[9]。 　　1.2.3 单因素试验 以花色苷含量为检测指标，以乙醇为提取液，考察乙醇体积分数40%、50%、60%、70%、80%，pH为1、2、3、4、5，液料比（mg/mL，下同）5∶1、10∶1、15∶1、18∶1、20∶1，超声时间5、10、20、30、 40 min，超声次数1、2、3、4，超声功率200、280、360、440、520 W这6个因素对桤叶唐棣花色苷含量的影响。 　　1.2.4 正交试验 在单因素试验的基础上，选择超声功率、液料比、超声时间3个因素，依据L9（34）正交试验，进行提取桤叶唐棣花色苷工艺优化组合，研究这些因素对花色苷含量的影响。正交试验因素与水平见表1。 　　1.2.5 花色苷含量测定 用移液枪精密移取提取液1 mL，分别用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液定容至10 mL，置于40 ℃恒温水浴20 min后，分别在530 nm和700 nm处进行提取液吸光度测定。应用pH示差法计算花色苷含量[10]，花色苷含量（以矢车菊色素-3-葡萄糖苷计，单位：mg/100 g）计算公式如下： 　　A=（A530 nm-A700 nm）pH1.0-（A530 nm-A700 nm）pH4.5 　　式中，V为提取液总体积（mL）；m为取样量（g）；26 900为矢车菊色素-3-葡萄糖苷的摩尔消光系数；449.2为矢车菊色素-3-葡萄糖苷的摩尔分子质量。 　　2 结果与分析 　　2.1 桤叶唐棣花色苷的吸收光谱 　　由图1可知，桤叶唐棣中花色苷的最大吸收波长为 530 nm，符合花色苷类物质的吸收光谱。 　　2.2 单因素试验结果 　　2.2