高效液相色谱法对水产品中虾青素的测定.docVIP

高效液相色谱法对水产品中虾青素的测定 　　摘要：建立水产品中虾青素含量的高效液相色谱测定方法。样品经乙腈萃取、超声提取、离心后，将上清液旋转蒸发、定容，用液相色谱-紫外检测器检测，外标法定量。虾青素浓度在0.02～10.00 μg/mL范围内线性关系好，相关系数0.999 5;加标回收率为91.9%～95.8%，检出限为10.00 μg/kg。该方法准确度高，重现性好，易操作，适用于水产品中虾青素含量的测定。 　　关键词：高效液相色谱法;虾青素;水产品 　　中图分类号：O657.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）20-4958-02 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.20.050 　　Determing Astaxanthin in Aquatic Products with HPLC 　　WU Xiang-qing，LI Xiao-zheng，YANG Shu-li，WU Ming-yuan，Xie Zong-sheng，Chen Jing， 　　QIN Zhen-fa，HUANG Luan-yu 　　（Fisheries Disease Prevention Environmental Monitoring and Quality Testing Center of Guangxi， Guangxi Academy of Fishery 　　Sciences， Nanning 530021， China） 　　Abstract： A HPLC method was developed to analyzed of astaxanthin in aquatic products. The samples were ultrasonically extracted with acetonitrile after centrifugation. The supernatant was evaporated and resolved. The determination was performed by HPLC with UV detector. The external calibration standard was used for quantification. The linear range was 0.02～10 μg/mL（R=0.999 5）with a good linearity. The recovery range was in 91.9%～95.8% with the detection limit of 10 μg/kg. The method is accurate， reproducible， easy for determing astaxanthin in aquatic products. 　　Key words： HPLC; astaxanthin; aquatic products 　　虾青素（Astaxanthin）化学名称为3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，β′-胡萝卜素，分子式为C40H52O4，广泛存在于生物中，其抗氧化活性是维生素E的500倍以上[1，2]，具有抗肿瘤、降血脂以及增强人体免疫的功能[3，4]。虾青素为海洋甲壳类动物和鱼类色素的主要成分，鲑鱼、龙虾等海产品红润的肉色即为虾青素所体现，但人工养殖的水产品无法合成虾青素，须在饲料中补给[5]。因此，目前虾青素主要作为水产养殖的添加剂，广泛应用于黄颡鱼、胡子鲶、大口鲶和甲鱼等，是我国农业部在1126公告（2008）中惟一允许使用的着色剂。虾青素主要来源于人工合成和天然动物提取，饲料中使用的虾青素主要为人工合成品，合成虾青素在组织中沉积率要高于天然色素[6]，且价格便宜。虾青素的检测方法包括薄层色谱法、分光光度法[7，8]、色谱法[9，10]。本试验建立高效液相色谱法测定水产品中虾青素，方法操作简单、结果准确，适用于水产品中虾青素定量测定。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器 　　Accela液相色谱仪（美国Thermo公司），配PDA检测器;B-490旋转蒸发仪（美国BUCHI公司）;TDD-4离心机（长沙平凡仪器仪表有限公司）;SK3300LH超声仪（上海科导仪器公司）。 　　1.2 试剂 　　标准物质虾青素，纯度≥98%，购于德国Dr. Ehrenstorfer公司。乙腈为色谱纯，购自国药集团化学试剂有限公司。 　　1.3 方法 　　1.3.1 虾青素标准溶液的配制 称取虾青素10 mg，用乙腈定容至100 mL，配成浓度为100 μg/mL的标准储备液，4℃避光保存。