高效液相色谱法测定福寿胶囊的含量.docVIP

高效液相色谱法测定福寿胶囊的含量 　　【摘 要】本文采用高校液相测定了福寿胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量，固定相为：YMCC18色谱柱（4.6*250*5μm），乙腈一水（15：85）为流动相，检测波长为322nm；2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在4～32μg?mL-1范围内呈良好的线性关系。2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的平均回收率为99.3%。本方法是一种简便、准确，可用于福寿胶囊含量的测定。 　　【关键词】福寿胶囊；含量；测定 　　福寿胶囊为胶囊剂，内容物为深褐色的粉末；味苦、微涩。福寿胶囊由巴戟天（去木心）、何首乌（制）、枸杞子、绞股兰、玫瑰茄、余甘子、灵芝（切小块）、黑豆组成。福寿胶囊具有滋补肝肾，调养脏腑，益气养血，扶正固本的功效。福寿胶囊具有改善视力、改善性机能状态的作用。福寿胶囊常用于改善中老年人的疲倦乏力、失眠多梦、畏寒肢冷等临床症状。何首乌（制）具有补益精血的功效。何首乌常用于血虚头昏目眩、失眠、须发早白、肠燥便秘、风疹瘙痒、痔疮等[1-4]。《药品化义》记载：“益肝，敛血，滋阴。治腰膝软弱，筋骨酸痛，截虚疟，止肾泻，除崩漏。”二苯乙烯苷具有抗氧化、抗肿瘤、降低胆固醇、清除自由基、抑制动脉粥样状硬化等作用[5-10]。本文用高效液相法对福寿胶囊中的2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的进行了含量测定。 　　1.仪器与试药 　　QTR3120基本加热型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；JA1003N电子精密天平（上海佑科仪器仪表有限公司）；EPED-RO-EDI超纯水机（南京易普易达科技发展有限公司）； R-1050大型旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）；UWB-6恒温水浴箱（北京优晟联合科技有限公司）；LC-5520高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；HCT-360液相色谱仪柱温箱（南京科捷分析仪器有限公司）。盐酸（兰州蓝洋石化有限公司）、乙醚（深圳三原化工有限公司）、甲醇（河南省新乡市中原有机化工有限责任公司）、冰乙酸（东莞市嘉盈新能源有限公司）、乙腈（兰州蓝洋石化有限公司）、三乙胺（南宁美?化工有限公司）。 　　2.含量测定 　　2.1色谱条件 　　依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[9-10]。色谱柱为YMC C18色谱柱（4.6*250*5μm）；乙腈一水（15：85）为流动相；检测波长为322nm；流速1.0mL?min-1；柱温：30℃。理论板数按2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不得低于2000。 　　2.2供试品溶液的制备 　　取福寿胶囊内容物适量，研细，精密称定，加20毫升氯仿，回流提取30分钟，过滤，残渣，加75%甲醇20毫升超声20分钟，过滤，水浴蒸干滤液，残渣加5毫升甲醇溶解，过0.45μm的滤膜，即得。 　　2.3对照品溶液的制备 　　精密称取2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品约5mg，置50毫升容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取10毫升，置100毫升容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷10μg）。 　　2.4阴性干扰试验 　　按方中比例取巴戟天（去木心）、枸杞子、绞股兰、玫瑰茄、余甘子、灵芝（切小块）、黑豆等药材，按照制备工艺方法制成阴性制剂，按2.3项下方法制成供试品溶液，按色谱条件测定。结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。 　　2.5标准曲线的制备 　　制备浓度为4、8、16、20、24、28、32μg?mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品在4～32μg?mL-1范围内线性关系良好。 　　2.6精密度试验 　　精密吸取2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.55%。结果表明，本实验精密度良好。 　　2.7重现性试验 　　分别称取同批福寿胶囊样品6份，分别制备成供试品，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.63%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。 　　2.8稳定性试验 　　取供试品溶液，分别在0，