高效液相色谱―串联质谱法测定动物肝脏中20种全氟烷基类化合物.docVIP

高效液相色谱―串联质谱法测定动物肝脏中20种全氟烷基类化合物 摘 要 建立了QuEChERs-高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）同时测定动物肝脏中20种全氟烷基类化合物（Perfluorinated alkyl substances， PFAS）残留量的分析方法。样品用0.1% HCl-乙腈振荡提取，C18、N-丙基乙二胺（PSA）和石墨化碳黑（GCB）净化，在C18色谱柱，以5 mmol/L NH4Ac甲醇溶液和5 mmol/L NH4Ac溶液为流动相进行梯度洗脱。多反应监测（MRM）负离子模式，采用基质匹配同位素内标法和外标法结合进行定量分析。20种PFAS在0.1～10 μg/L浓度范围内呈线性关系，相关系数不小于0.995;检出限为0.05～0.2 μg/kg，定量限为0.4～0.5 μg/kg。动物肝脏中20种PFAS的3个浓度水平（0.5， 2和5 μg/kg）加标的平均回收率为70.3%～108.1%，相对标准偏差（RSD）在2.1%～11.9%（n 6）之间。 关键词 全氟烷基类化合物;QuEChERs;高效液相色谱-串联质谱;动物肝脏 1 引 言 全氟烷基类化合物（PFAS）是一类具有重要应用价值的含氟有机化合物，含有极高化学键能（约为110 kcal/mol）的〖JG（〗C〖ZJY〗F〖JG）〗共价键，其稳定性高，具有疏油、疏水等特性，被广泛应用于纺织、造纸、包装、农药、地毯、皮革、洗发香波和灭火泡沫等工业和民用领域lt;supgt;[1]lt;/supgt;。PFAS能够经受很强的热、光照、化学、微生物作用和高等脊椎动物的代谢而不降解lt;supgt;[2]lt;/supgt;，可以随食物链的传递在生物机体内富集和放大至相当高的浓度lt;supgt;[3，4]lt;/supgt;，PFAS在生物体内的蓄积水平高于已知的有机氯农药和二恶英等持久性有机污染物的数百至数千倍lt;supgt;[5]lt;/supgt;。 研究发现，PFAS具有诱发肝中毒、发育毒性、免疫毒性、内分泌干扰以及潜在致癌性等毒理效应lt;supgt;[6，7]lt;/supgt;。2006年，欧盟议会通过决议，规定欧盟市场上全氟辛烷磺酸在配制品中的含量不得超过产品质量的0.005%，半成品中不得超过0.1%，纺织品或?料中不得超过1 μg/m2， 标志着欧盟正式全面禁止全氟辛烷磺酸在商品中的使用lt;supgt;[8]lt;/supgt;。PFAS主要分布于动物的血液、肝脏、肾脏、心脏和肌肉等组织中，并以血液和肝脏中浓度最高。因此，建立快速、灵敏、准确地测定动物肝脏中PFAS的方法尤为重要。 目前，检测PFAS的常用方法是高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS），样品前处理多采用液液萃取或离子对试剂提取，WAX固相萃取柱[9～12]净化。传统的前处理方法步骤繁琐、耗时长，方法重现性不好。相比之下，以基质分散固相萃取为基础的QuEChERs（Quick， Easy， Cheap， Effective， Rugged and Safe）方法因其具有灵敏、高效、快速等特点，近年来被广泛应用。 HPLC-MS/MS技术具有高的灵敏度、选择性和重现性，是目前分析PFAS常用的方法lt;supgt;[13]lt;/supgt;。根据动物肝脏基质的特点，本研究采用QuEChERS方法对样品进行提取和净化，采用基质匹配同位素内标法和外标法结合进行定量分析，建立了基质校正HPLC-MS/MS同时测定动物肝脏中20种PFAS残留量的分析方法。本方法简单、实用性强、分析速度快，可广泛用于动物类样品中PFAS的分析。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 ACQUITY UPLCTM超高效液相色谱仪配TQD三重四级杆质谱仪（Waters公司）;D160均质/分散机（Dragon Lab公司）;TRIO TM-1N型旋涡混合器（AS ONE公司）;SR-2DS型水平振荡器（TATEC公司）;3-30K型高速冷冻离心机（Sigma公司）;N-EVAP 112型氮吹仪（Organomation Associates公司）;Milli-Q超纯水仪（Millipore公司）;KQ-600B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 全氟丁酸、全氟戊酸、全氟丁烷磺酸钾、全氟己酸、全氟庚酸、全氟己烷磺酸钠、全氟辛酸、全氟庚烷磺酸钠、全氟壬酸、全氟辛烷磺酸钠、全氟癸酸、全氟癸烷磺酸钠、全氟十一烷酸、全氟十二烷酸、全氟十三烷酸、全氟十四烷酸、全氟十六烷酸、全氟十八烷酸、全氟壬烷磺酸钠、全氟戊烷磺酸钠和同位素内标13C4-全氟丁酸、13C2-全氟己酸、18O2-己烷磺酸钠、13C4-全氟辛酸、13C4-辛烷磺酸钠、13C5-全氟壬酸、13C2-全氟癸酸、13C2-