高效液相色谱法同时测定金银花中的六种成分.docVIP

高效液相色谱法同时测定金银花中的六种成分 　　摘要：建立同时测定金银花（Lonicera japonica Thunb.）中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、槲皮素含量的高效液相色谱法。采用Aglient phenyl柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相乙腈（A）-0.5%醋酸（B）为流动相梯度洗脱，在波长365 nm检测绿原酸、在波长327 nm检测咖啡酸，在波长358 nm检测芦丁、金丝桃苷、木犀草苷，在波长368 nm检测槲皮素，柱温40 ℃，进样量10 μL。结果表明，6种化合物分别在测定范围内呈现良好的线性关系，回收率为96.85%～103.61%。该方法准确、快速、简单地进行金银花中6种成分的测定。 　　关键词：金银花（Lonicera japonica Thunb.）；绿原酸；咖啡酸；芦丁；金丝桃苷；木犀草苷；槲皮素；高效液相色谱 　　中图分类号：O657.72 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）08-2100-02 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.08.046 　　Abstract：To develop an HPLC method for the determination of chlorogenic acid，caffeic acid， rutin， hyperoside，luteoloside， quercetin in Lonicera japonica Thunb. The analysis was carried out on an Aglient phenyl column（4.6 mm×250 mm，5 μm） by a gradient elution using（A） acetonitrile-（B）water（0.5% HAc），the detection was set at UV 365 nm to detecte chlorogenic acid，UV 327 nm to detecte caffeic acid，UV 358 nm to detecte rutin，hyperoside，luteoloside，UV 368 nm to detecte quercetin. The column temperature was 40 ℃ and injection volume was 10 μL. The recovery of the method was in the range of 96.85%～103.61%，and the six compounds showed good linear relationship in a detected concentration range. The method was proved to be precision，repeatability， simple and accurate.It was successfully applied to the analysis of the 6 components in Lonicera japonica Thunb. 　　Key words： Lonicera japonica Thunb.； chlorogenic acid；caffeic acid； rutin； hyperoside； luteoloside； quercetin； HPLC 　　金银花（Lonicera japonica Thunb.）是忍冬科植物忍冬、红腺忍冬、山银花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或带初开的花，主产区为山东平邑等地。药理研究表明，金银花具有抗菌、抗病毒、护肝、解热、止血、抗氧化、降血脂等多种功效[1，2]，主要含有绿原酸、咖啡酸、奎宁酸、阿魏酸等有机酸，还含有芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、槲皮素等黄酮成分，有机酸和黄酮是金银花抑菌抗病毒的主要活性成分[3，4]。2010年版中国药典将绿原酸和木犀草苷作为金银花药材的质量控制指标，采用C18柱和苯基柱分别测定，不利于快速鉴定金银花药材的成分。金银花的成分分析一般采用C18柱，而使用苯基柱且采用变换波长同时测定金银花中的6种成分，尚未见文献报道，该方法简单、快速、准确地分析金银花的质量。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　LC-10Atvp型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SP-UV2000型紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；电子天平（日本AN公司）。 　　1.2 试药 　　绿原酸、木犀草苷（中国药品生物制品检定所）；芦丁、咖啡酸（北京希凯创新科技有限公司）；槲皮素（天津马克生物技术有限公司）；金丝桃苷（TREE