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山东省西瓜细菌性果斑病的病原菌鉴定 　　摘要：近年来，在山东省临沭县、昌乐县、章丘县等地西瓜育苗基地的西瓜苗上发现了一种新病害――西瓜细菌性果斑病。从病果和病叶片上分离到15个细菌菌株，选取8个菌株进行致病性测定，结果表明，该8个菌株均能侵染西瓜，发病症状和自然发病症状完全一致；从接种发病的病果上可重新分离到相同的细菌。对该8个菌株菌体形态、染色反应、培养性状及其生理生化特性等项目进行观察测定，确认供试菌株为燕麦食酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp. citrulli Willems et al.，1992）。 　　关键词：西瓜；细菌性果斑病；病原鉴定 　　中图分类号：S432.4+2 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2014）03-0083-03 　　AbstractIn recent years， watermelon had been attacked by a new bacterial disease called bacterial fruit blotch （BFB） in some planting areas of Shandong Province， including Linshu， Changle and Zhangqiu. Fifteen strains were isolated from diseased fruits and leaves of watermelon. The inoculation tests were conducted with 8 strains， which produced the same symptoms as naturally infected plants. And the same strains were isolated from inoculated watermelon. Based on the mycelial morphology， staining reaction， cultural characteristics and a series of physiological and biochemical properties， the pathogens were identified as Acidovorax avenae subsp. citrulli Willems et al.，1992. 　　Key wordsWatermelon； Bacterial fruit blotch； Pathogen identification 　　自2009年始，山东省临沭县、昌乐县、章丘市等西瓜育苗基地西瓜普遍发生一种细菌性病害，发病程度轻重不等，如临沭县西瓜育苗基地所育26万株西瓜苗全部封埋销毁，造成极大损失。2010～2013年笔者在章丘西瓜育苗基地抽检的西瓜苗上同样分离到该种细菌，根据病害症状推测是Acidovorax avenae subsp. citrulli Willems， Goor ， Thieiemans， Gillis， Kersters Ley。因此，有必要对该细菌性病害的病原菌进行系统鉴定来加以确认，为该病害的防治提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　1.1.1供试材料2009年从山东省临沭县大棚采集的双星、京欣、极品京欣西瓜病果。对照菌株为燕麦食酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp. 　　citrulli Willems et al.，1992），由山东农业大学植保学院植物病理学系提供。 　　1.1.2培养基NA培养基为分离培养基，KB培养基用于观察荧光反应[3]。 　　1.2试验方法 　　1.2.1病原菌分离、纯化取病组织，用灭菌剖解刀切取病健交界处组织，75%酒精消毒2 s，移至0.1%升汞液消毒1～2 min，经灭菌水冲洗后置于小瓷皿中研磨，加无菌水浸20 min，然后用移菌环蘸取组织液在NA培养基划线，28℃培养48 h，长出单菌落后在NA培养基再划线，使细菌纯化。纯化后的各菌株编号保存冰箱中备用。 　　1.2.2马铃薯软腐将马铃薯洗净用75%酒精表面消毒，切成5 mm厚的薯片，在无菌操作下放在无菌培养皿中。将在NA培养基上培养24 h的供试菌株用移菌环接在块茎上，28℃条件下培养48 h后，观察马铃薯软腐情况。 　　1.2.3病原菌的致病测定8个菌株与对照菌株在28℃条件下培养24 h，配成3×108个/ml菌悬液，喷雾和刺伤接种于健康西瓜幼苗4～6叶和果实，同时以接清水为对照（CK）。在28℃下保湿48 h，之后白天光照，晚上保湿，每天注意观察发病情况。 　　1.2.4细菌学性