茶树抗寒育种及转基因研究进展.docVIP

茶树抗寒育种及转基因研究进展 　　作者简介：孙海伟（1973-），男，博士，副研究员，主要从事茶树、果树遗传育种研究。 　　摘要：茶树[Camellia sinensis（L）OKuntze]是原产我国的叶用木本植物，山东自“南茶北引”取得成功以来，冬季低温胁迫导致的冻害常造成经济损失。所以，抗寒育种研究一直是茶树研究的热点和难点。本文阐述了茶树抗寒育种的研究进展，包括抗寒性研究、选育的抗寒品种、抗寒基因的分离和鉴定及转基因研究现状。 　　关键词：茶树；抗寒育种；抗寒基因；转基因 　　中图分类号：S571.103.4 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0119-05 　　茶树[Camellia sinensis（L）OKuntze]属山茶科，山茶属，原产于我国西南地区，是一种喜温暖气候条件的叶用植物。随着人们对茶叶保健功能的认识，茶叶需求量逐年增加，茶树栽培面积不断扩大，种植区域不断向北方拓展。山东省是我国的次适宜高纬度茶区，由于冬季气温低、持续时间长，茶树极易受到冻害影响，给茶叶生产带来严重的损失。自20世纪50年代末尝试引种茶树以来，山东茶树引种栽培面积已经达到167×104 hm2[1]，几乎每年都要遭受不同程度的低温冻害，导致严重的经济损失。因此，抗寒育种成为茶树育种研究的热点。 　　1 茶树抗寒性的研究 　　茶树的抗寒性是在茶树长期适应低温胁迫的过程中通过自然选择而逐步发展和形成的一种形态和生理特征。茶树等温带地区的常绿阔叶树种在抗寒机理上与草本植物和落叶木本植物有所不同：与草本植物相比，其冷驯化能力大得多，冷驯化机制更为复杂；与落叶木本植物相比，尽管具有季节性生长调节的特性，但其越冬叶却没有落叶木本植物叶那种遇冷引发的衰老、脱落过程，也不存在类似芽的内生性休眠过渡。研究者们先后从叶片的形态及解剖结构变化、束缚水含量、细胞液浓度、保护酶类（如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶等酶类）、低温膜损伤、茶树冰核活性细菌等多方面探索了茶树的抗寒机理[2～11]，也找到了相应的技术措施来提高茶树抗寒能力，但是几乎所有措施都需要投入大量的人力、物力、财力[1]。选育抗冻能力突出的良种，改良茶树自身的遗传因素来提高抗寒性能以抵御低温胁迫是解决这一问题最根本的方法[12]。 　　何孝延[2]对30份乌龙茶品种资源进行抗寒性鉴定，结果表明，从整体而言，福建乌龙茶品种间的抗寒性无明显差异，均表现为较抗寒类型。梅丽等[3]以从山东省茶叶主要产区（泰安市、青岛市、日照市）采集的共计51个茶树类型和品种的叶片为材料，对其内部结构与抗寒性的关系、内部结构与生产力指数的关系和束缚水含量进行了系统的研究，发现山东引种茶树由于样品间的差异以及所处地区的不同，抗寒能力与生产力指数均表现出明显的差异；在所用的样品中，抗寒能力劲峰最强，生产力指数福鼎大白毫最高，束缚水含量类型3最高、云南小叶最低；相关性分析表明，对山东引种茶树进行抗寒性评价时除了依据栅栏组织/海绵组织之外，栅栏组织细胞数目也是一个重要的评价指标；束缚水的含量与基于叶片解剖结构计算的抗寒性指标之间未见明显的相关性，而束缚水含量/自由水含量与基于叶片解剖结构计算的抗寒性指标之间可见一定程度的正相关；进行生产力评价时除了依据栅栏组织厚度与栅栏组织细胞数目之外，叶肉组织厚度与叶全厚度也是比较可靠的评价指标，基于叶片解剖结构计算的抗寒性指标与生产力指数之间呈不显著的正相关。孙锐等[4]选取山东引种茶树的抗寒性较强的劲峰和抗寒性较弱的黄早作为材料，在冰冻胁迫条件下观察细胞、组织水平的结构变化，评价冻害的影响和受冻的原因，并且探讨了细胞内各种细胞器对冻害表现出的不同稳定性。孙仲序等[5]经对山东10地市茶区、6个气象因子作最短距离聚类分析得出，山东茶主要分布在4个生态类型区域内，茶树冻害由轻到重呈花斑式分布；各气象因子与叶片组织结构变化呈正相关性，以年降水量和极端最低温度对茶树变异影响最大，其次是年平均温度、无霜期和日照时数，1月份年均气温对叶片结构变化影响不大；叶片结构以栅栏组织厚度对气候条件最敏感，其次是栅栏组织与海绵组织的比值、海绵组织厚度，叶片厚度和上表皮厚度与气象因子无关。杨亚军等[7]研究了冷驯化和ABA对茶树抗寒力及其体内脯氨酸含量的影响，结果表明，通过冷驯化或者ABA处理，茶树经历了驯化再到脱驯化的过程，其抗寒力也相应地发生了很大的变化，由驯化前的几乎为零逐渐提高，而随着脱驯化的进行又迅速恢复到驯化前的水平；低温驯化的临界温度为7℃左右，脱驯化的临界温度为9℃左右；人工低温驯化和ABA处理，茶树抗寒力的提高幅度没有自然冷驯化下的大；冷驯化中茶树体内脯氨酸含量变化是对外界条件变化的一种综合反应，很难说明单一的脯氨酸含量与抗寒力之间的因