3---基因表达调控.ppt

5、基因表达的生物学意义： 主要体现在适应环境，维持生长、增殖、个体发育和分化等方面。 RNA interference RNAi 的发现与证实 RNA干涉 RNA interference，RNAi ： 是指内源性或外源性双链RNA dsRNA 介导的细胞内mRNA发生特异性降解，从而导致靶基因的表达沉默，产生相应功能表型缺失的现象。 三、翻译水平的调控 ★ mRNA 的寿命对翻译的调节 第二节 真核生物的基因表达调控 一、DNA水平的基因表达调控 基因重排 二、转录水平的调控 增强子（enhancer） 三、 转录后水平的调控 顺式剪接（cis-splicing） 遗传密码（genetic codon）的特点 1.连续性; 2.简并性; 3.摆动性; 4.通用性; 5.有起始子 AUG 和终止子 UAG,UAA,UGA 多聚核糖体 在一条mRNA链上，多个核糖体呈串珠状排列（间隔80个核苷酸），多个核糖体同时在一条mRNA上进行翻译， 大大加速蛋白质合成的速度，提高了mRNA的利用率 三 tRNA和氨基酰-tRNA tRNA的反密码子环与mRNA的密码配对 tRNA的3--端CCA--OH是氨基酸的结合位点 氨基酰-tRNA合成酶具有绝对专一性 校正活性 氨基酰-tRNA的写法 四 蛋白质生物合成过程 1 翻译的起始 蛋氨酰-tRNA与mRNA结合到核糖体形成起始复合物 起始复合物的生成 真核生物翻译起始的特点 eIF 1~11 蛋氨酰-tRNAimet mRNA的5′端有帽子结构，3′端有polyA　 核糖体为８０Ｓ 先结合上蛋氨酰-tRNAimet ，再结合mRNA 2　肽链的延长 延长因子 EF 核糖体循环: 　注册，成肽，转位 1）注册 氨基酰－tRNA进入A位,需要EF-T协助 （-GTP） 2） 成肽 转肽酶 3）转位 转位酶 （-GTP） mRNA向前移动一个密码子的位置 耗能 3 肽链合成的终止 终止密码的辨认，肽链从肽链-tRNA上水解出，mRNA从核糖体中分离，大小亚基拆开。 需要RF参与终止， RF的作用是 辨认终止密码 促进肽链C端与tRNA3-OH酯键的水解。 原核生物： RF-1识别UAA及UAG RF-2识别UAA及UGA RF-3 能促进RF-1和RF-2对核糖体的结合。 是酯酶的激活物 翻译后的加工 翻译后加工--肽链从核蛋白体释放后，经过细胞内各种修饰处理过程，成为有活性的成熟蛋白质 一、高级结构的修饰 （一）亚基聚合 四级结构 Hb α2β2 （二）辅基连接 结合蛋白 二、一级结构的修饰 （一）. 切除N-端的甲酰基或N-蛋氨酸: 脱甲酰基酶或氨基肽酶 （二）. 个别氨基酸的修饰 羟脯氨酸,羟赖氨酸的羟化; 含-OH的丝氨酸,苏氨酸,酪氨酸的磷酸化; 多肽链二硫键的形成 （三）. 水解修饰 鸦片促黑皮质素原 POMC 4. 转录的底物是4种核糖核苷三磷酸 rNTP ，即ATP、GTP、CTP和 UTP；RNA与模板DNA的碱基相互配对关系为G-C 和A-U。而复制的底物是dNTP，碱基互补配对关系为G-C 和A-T。 5. RNA的合成依赖于RNA聚合酶的催化作用，而DNA复制需要DNA聚合酶，两种聚合酶系不同。 6. 转录时DNA-RNA杂合双链分子是不稳定的，RNA链在延伸过程中不断从模板链上游离出来，模板DNA又恢复双链状态；而DNA复制叉形成之后一直打开，不断向两侧延伸，新合成的链与亲本链形成子链。 7. 真核生物基因和rRNA、tRNA基因经转录生成的初级转录物一般都需经过加工，才能具有生物功能和成熟的RNA分子。 二、RNA聚合酶 （一）大肠杆菌RNA聚合酶 大肠杆菌中只有一种RNA聚合酶负责所有mRNA、rRNA和tRNA的合成，它是一种复合酶，由5个亚基组成 α2ββ’σ ，α2ββ’四个亚基构成核心酶，核心酶与σ亚基构成全酶，σ亚基能识别启动子，并与DNA形成稳定的起始复合物，参与转录的起始。 （二）真核生物RNA聚合酶 真核生物细胞内负责转录的RNA聚合酶有三类：即RNA聚合酶I，II和III，它们在细胞中处于不同的部位。 其中RNA聚合酶II为主力酶。 三、基因转录的一般过程 （一）转录的起始；（二）转录的延伸；（三）转录的终止 转录的起始 转录延伸的移动方式 RNA链的延伸 原核生物转录的终止处有特殊结构的存在，称为终止子。 原核生物的终止子分为二种，一种为强终止子，另一种为弱终止子。强终止子存在回文结构，且富含GC序列，其3’端有多个核苷酸的寡聚U。 强终止子的结构 ρ因子不依赖转录终止机制 弱启动子也存在回文序列，易形成发夹二级结构，