第七章细菌和病毒的遗传ppt.pptVIP

1946年，Lederberg和Tatum发现E.coli细胞之间通过接合可以交换遗传物质。他们选择了两个不同营养缺陷型的E.coli菌株 A菌株是met-bio-，它需要在基本培养基上补充甲硫氨酸和生物素，B菌株是thr-leu-它需要在基本培养基上补充苏氨酸和亮氨酸。 A菌株和B菌株在基本培养基上都不能生长，但是如果将A和B混合培养在完全的液体培养基上几个小时后，把培养物离心，并且把洗涤的沉淀细胞涂在基本培养基上，发现长出了一些原养型，met+、 bio+、thr+、leu+的菌落(如图7-10)。 图 7－10 黎德伯格和塔特姆的接合(杂交)试验 证明大肠杆菌发生遗传重组 发现长出了一些原养型的菌落。这种原养型细胞的出现是由于转化还是由于细胞与细胞直接接触而发生的遗传物质交换和重组？为了解答这个 问题，Davis (1950)设计了 U型管实验 （动画A203） 在任何一臂内都没有出现原养型细菌。这说明两个菌株间的直接接触--接合，是原养型细胞出现的必要条件。 Hayes（1952)试验证明，在接合过程中遗传物质的交换是一种单向的转移： 供体（雄性）→ 受体（雌性） 1、F因子及F+/Hfr向F–的转移 Hayes和Cavalli-Sforza（1953)发现，供体有一个性因子即致育因子--F因子 ，由DNA组成， 是染色体外的 遗传物质。其 组成： E.coliF因子存在状态有三种类型： ①没有F因子，即F– ②游离状态的F因子，即F+ ③整合的F因子，即Hfr F+×F- ↓ F+ → F+ F- → F+ 这种F因子的传递与细菌染色体无关。但是F因子偶然地(10000个F+细胞中有一个)能整合到细菌染色体中去，就可能引起染色体的转移 5’ 图 7－13 两个E.Coli 细胞杂交的电子显微镜照片(X 34,300) 性伞毛/接合管 Hfr×F- ↓ Hfr → Hfr F- → F- 接合开始，F因子仅有一部分进入F–细胞，剩下部分基因只有等到细菌染色体全部进入到F–细胞之后才能进入，然而转移过程常常中断 5’ 受体细胞常常只接受部分的供体染色体，这些染色体称为供体外基因子，而受体的完整染色体则称为 受体内基因 子，这样的 细菌称为部 分二倍体或 部分合子、 半合子 动画 A206 2、中断杂交试验及染色体连锁图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的，Jacob和Wollman在五十年代设计了一个著名的中断杂交试验 ? Hfr:thr+leu+lac+gal+azistonsstrs F- : thr-leu-lac-gal-aziRtonRstrR ? 每隔一定时间取样，放在食物搅拌器内搅拌 ? 培养在含str的完全培养基上， Hfr被杀死 ? 用影印培养法测试形成的F-菌落的基因型， 确定每个基因转入F-的顺序（时间） ? 根据基因转入F-的时间，进行细菌染色体作图 ? ? ? ? ? ? 图7－17 中断杂交后，重组体中Hfr遗传性状出现的频率 thr leu azi ton lac ga F O 8 8.5 9 11 18 25 根据中断杂交实验作出的 大肠杆菌连锁图 用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验，基因转移的原点(O)和转移的方向不同，说明F因子和细菌染色体都是环状的 Hfr的 类型 基 因 转 移 顺 序 HfrH 1 2 3 AB312 0 thr pro lac pur