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- 2016-10-10 发布于湖北
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* 一、基础知识 1、提取生物大分子的基本思路 2、提取DNA的基本思路 利用DNA与 等在 方面的差异,提取DNA,去除其他成分 选用一定的 分离具有不同 的生物大分子 3、DNA提取原理 (1) DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同。 当NaCl的物质的量浓度为 mol/L时,DNA的溶解度最低。 蛋白质在0.14mol/L中的溶解度大,在高盐浓度下溶解度小。 (2)DNA不溶于酒精,细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 (3)DNA在 80℃ 以上才会变性,而在该温度下蛋白质会变性沉淀。 (4)洗涤剂可以瓦解细胞膜,但对DNA没影响。 (5)DNA的鉴定原理 在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 (一)实验材料的选取 选取DNA含量相对较高的生物组织。 从核DNA数目来看,猪38条,鸡78条,哺乳动物血0条,猕猴桃58条,洋葱16条,香蕉 33条,菠菜12条,大肠杆菌1条。 材料:新鲜的鸡血 注意:本实验中,要往鸡血中加入抗凝剂 (柠檬酸钠溶液) (1)先将新鲜的鸡血离心,获得鸡血细胞 (2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可 (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 1、破碎细胞 2、过滤,获取含DNA的滤液
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