葡萄籽蛋白提取艺研究.doc

葡萄籽蛋白提取工艺研究 赵毅敏 (孟州市质量技术监督检验测试中心，河南焦作454750) 摘要：采用碱溶酸沉法对葡萄籽蛋白提取工艺进行了研究．结果表明：葡萄籽粉碎粒度为40目，以pH值为9的 碱液，按m(料)：y(液)=1：10，在50℃条件下搅拌浸提45 min时，蛋白质的提取最经济． 关键词：葡萄籽；提取工艺；蛋白质；碱溶酸沉法 中图分类号：TQ 937 文献标识码：A 葡萄籽不仅含有原花青素、葡萄籽油，还含有丰富的优质蛋白质．葡萄籽榨油后的饼粕中含有13％。16％ 的蛋白质，采用脱壳工艺后饼粕蛋白含量高达30％IlI．葡萄籽蛋白中含有18种氨基酸，人体必需氨基酸俱 全，氨基酸总量较高，缬氨酸、精氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸均相当于大豆蛋白的含量，具有较高的开发利用价 值121． 目前，对于葡萄籽的开发利用主要集中于葡萄籽油13．41和花青素∞的提取，关于葡萄籽蛋白的研究目前 还处于初级阶段tTl，本文采用碱溶酸沉法对葡萄籽分离蛋白的提取工艺进行了研究，以期为开发这一新的优 质植物蛋白资源，发展可循环经济贡献自己的力量． 1实验部分 1．1材料、主要仪器和试剂 葡萄籽，购于民权葡萄酒厂，烘干备用． 电热恒温水浴锅(HH—S11-2型，北京长安科学仪器厂)，硫酸铜(天津市科密欧化学试剂有限公司)，硫 酸钾(天津市科密欧化学试剂有限公司)，氢氧化钠(天津市科密欧化学试剂有限公司)，浓盐酸(吴华化学试 剂有限公司)，凯氏定氮仪． 1．2实验方法 1．2．1 葡萄籽中总蛋白含量的测定和得率计算公式 1)葡萄籽中总蛋白含量的测定：准确称量3 g脱脂葡萄籽，分别加入O．1 g CuSO。，3 g K2sO。和30 mL浓 硫酸消化2．5 h，冷却后定容到100 mL．取5 mL采用微量凯氏定氮法用已标定为0．010 49 mol／L的盐酸标 准溶液定氮，做3次平行，每次平行滴定3次，计算总蛋白的质量分数 Co-VxNxCx6．25x20 x100t,,,llr-- ％． (1) 7U· ＼■／ 式中：co为葡萄籽中总蛋白质的质量分数，％：y为滴定所消耗标准盐酸的体积，L；m为葡萄籽的质量，g；C 为标准盐酸的浓度，0．01049 mol／L；N为氮的分子质量为14；6．25为凯氏定氮常数；20为稀释倍数． 2)相关公式Ct-—V×14×0．010—49x6．25×40×100％， (2) 一? 、厶， c2-鲁×100％， (3) C#里L×100％． (4) 式中：co为葡萄籽中总蛋白质的质量分数，％；C。为浸出蛋白的质量分数，％；c2为蛋白浸出率，％；c3为产品 得率，％；y为滴定所消耗标准盐酸的体积，L；m-为产品质量，g；m为葡萄籽粕质量，g；40为稀释倍数． 收稿日期：2009-05—12 作者简介：赵毅敏(1976一)，男，河南孟州人． 万方数据 一1230一河南科学第27卷第10期 1．2．2碱溶酸沉法提取葡萄籽蛋白质采用碱溶酸沉法从葡萄籽中提取分离蛋白，工艺流程为：葡萄籽_+ 晒干_+除杂_+破碎_过40目筛_碱液搅拌浸提叶过滤一滤液调酸一过滤_干燥-+成品． 为优化工艺，分别考察了浸提温度、碱液浓度、浸提时间和料液比对蛋白质浸提量的影响． 1)浸提温度对蛋白质提取率的影响：准确称取6份粉碎后的葡萄籽各5 g，分别加入6个250 mL圆底烧 瓶中，加入pH=9的碱液100 mL，分别在35，40，45，50，55，60℃条件下搅拌浸提40 min，抽滤，滤液用100 mL 容量瓶定容；取50 mL加入0．19 CuSO。，3 g K2SO。和30 mL浓硫酸消化，冷却后定容到100 mL：取5 mL采 用微量凯氏定氮法定氮，计算浸出蛋白质得率． 2)浸提时间对提取率的影响：准确称取6份粉碎后的葡萄籽各5 g，分II：II入6个250 mL圆底烧瓶中， 加入pH=9的碱液100 mL，50 oC条件下分别浸提30，35，40，45，50，55 min，抽滤．定容到100 mL；取50 mL 消化，冷却后定容到100 mL；取5 mL采用微量凯氏定氮法定氮，计算浸出蛋白得率． 3)料液比对提取率的影响：准确称取6份粉碎后的葡萄籽各5 g，加入6个250 mL圆底烧瓶中，分别加 入pH=9的碱液25，50，75，100，125，150 mL，50℃条件下浸提45 min，抽滤，定容到100 mL；取50 mL消化， 冷却后定容到100 mL；取5 mL采用微量凯氏定氮法定氮，计算浸出蛋白得率． 4)碱液浓度对蛋白质提取率的影响：准确称取5 g粉碎后的葡萄籽各5份，加入5个250 mL圆底烧瓶中， 分别加入pH为8，9，10，11，12的碱液75 mL，50℃条件下浸提45 min，抽滤，定容到100 mL；取50 mL消化， 冷却