第七版妇产科-第四十四章妇产科常用特殊检查.doc

第四十四章妇产科常用特殊检查 第一节妊娠试验 　　 妊娠试验是利用绒毛膜促性腺激素(HClG)的生物学或免疫学特点。检测受试者体内HCG水平的方法o HCG主要由台体滋养细胞分泌，可由受试者血清或尿液中测出。因此，可通过对仲cG的检测，协助诊断早孕及与妊娠有关的疾病，如异位妊娠、滋养细胞疾病等。妊娠试验方法很多，有生物测定及免疫测定两类方法。 　　(一)生物测定法 　　生物测定法有小白鼠试验、雌兔试验、雌蟾蜍试验、雄塘蜍试验等。若受试者的屎中含有一定量的HCG，作用于某些生物的生殖腺，可促使其排卵或排精子。但因动物饲养比较麻烦、昂贵、试验时间长，不同季节或室温以及受检尿液的酸碱度，均可影响试验结果。故目前已不再采用。 　　l二)免疫测定法 　　1．凝集抑制试验HCG是一种糖蛋白，具有一定抗原性。将HCG作为抗原注人动物体内，可使其产生相应抗体(抗HCG血清)。当这种特异抗体与抗原相遇时．即可发生免疫反应。但这种反应不能为肉跟所见。用化学方法将HCG交联在聚苯乙烯乳胶颗粒或羊红细胞上，内眼即可见到抗原和抗体的凝集反应。但因操作复杂，故凝集抑制试验已很少应用。 　　 2．放射免疫测定法(RIA)利用放射性同位素的特点与免疫学原理互相结舍．具有特异性强、曼敏度高(10ng,，血)的优点。其原理是应用放射性同位素标记}*cG，形成标记抗原。以一定量的标记抗原，与各种不同量的非标记HCG和一定浓度的特异性抗HCG抗体相互作用，其反应遵照质量作用定律，标记HCG与非标记HCG竞争抗HCG抗体的结合部位，产生不同的结合率。当标记的HcG与抗HCG抗体的量保持一定时，则标记的HCG与抗HCG抗体形成的复合物的多少就反映了待检物HCG的含量。按照结合率与非标记}IcG量为函数，画出标准竞争抑制曲线。根据测得的结合率，在曲线上找出相应的HCG量，得出精确的待检标本的HCG含量。 　　 由于HCG的a亚单位与LH等有交叉反应，故现已采用阻HcG放免测定．使交叉反应降到最低水平，正确地反映了受试者的HCG水平。阻HCG放免测定方法同上，但标记抗原为争HCG亚型，特异性HCG抗体也是抗争HCG抗体。 　　 放射免疫测定法，因为操作较复杂，需时间较长，需有一定的设备。又有放射性污染，使其应用受到一定限制。 　　 3．酶免疫测定法(emyme-mmmmssay，EIA) 检测HCG的酶免疫方法常用固相酶免疫测定(emyme linked lramuneeorbent assay，ⅡJSA)，而最常应用的是双抗体夹心 　　 一445～法：将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体，洗涤除去未结合抗体及杂质，加受检标本，使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相抗体充分结合，形成固相抗原抗体复合物，洗涤除去未结合物质，加酶标抗体，使固相复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时，固相载体上带有的酶量与受检抗原的量相关。加底物显色——夹心式三层结构复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色的深浅程度进行定性或定量分析。 　　 酶免疫测定法特异性强，灵敏度高，试剂廉价，操作简单。对HcG的敏感度为25—50l∥II】l。应用比较广泛。 　　 目前应用广泛的早早孕诊断试纸，也称单克睡抗体早孕检测，其原理与酶免疫法相同。只是应用胶体金标记抗体，省去了酶标记测定中与底物作用的步骤，加入金标记后直接在试纸上显示红色，更方便快捷。具体操作步骤：留被检妇女尿(晨尿更佳)于小尿杯内，用带有试剂的早早孕诊断试纸条(试纸条上端为对照测试线，下端为诊断反应线)，将标有hlAx的一端插入尿液中．尿的液面不得越过MAX线。l一5分钟即可观察结果，10分钟后结果无效。结果判断：仅在白色显示区上端呈现一条红色线，则为结果阴性；在白色显示区上下呈现两条红色线则为结果阳性，提示妊娠。试纸反应线因标本中所含HcG浓度多少可呈现出颜色深浅的变化。若试纸条上端无红线出现，表示试纸失效或测试方法失败。此法可检出尿中HCG的最低量为25lJ／L。 　　 另外，也有利用斑点免疫层析法的原理制成的反应卡。反应卡的设计因厂家不同而异。通常，反应卡为一扁形塑料小盒，其内固定有一张硝酸纤维素膜．该膜预先用抗HcG包被。操作时，将待检尿液滴于加样窗，3—5分钟后看结果。如待检样中古HcG，通过膜的层析作用向前移动，在结果窗口出现蓝色线条；若待检样中不含}IcG，仅在对照窗口出现蓝色线条。在另一种反应卡上．如待检样中含HcG，在观察处出现红色斑点；若待检样中不含Hcc，在观察处不出现红色斑点。 　　 4．酶放大化学发光免疫分析某些化台物分子被氧化后，可以形成激发态并返回激态同时发射光于．这就是化学发光。Dioxe~e p}瞒pIlak作为发光物质，在它的分子结构中有两个重