专题4酶的与应用技巧.ppt

探究的问题是实验设计的依据,在此基础上,还要选择恰当的实验方法在实验设计的各个环节都要注意单一变量和等量原则,才能最大限度地保证实验的成功. * 2016届第一轮复习之—— 选修1《生物技术实践》 绥德县第一中学 陕西省?绥德 课题1　果胶酶在果汁生产中的作用 一、果胶酶的作用 （一）果胶: 1、植物细胞壁及胞间层的主要成分之一：在植物细胞间层和初生壁中与纤维素结合，是重要的黏合和支撑物质。 2、成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物 3、特点：不溶于水 4、在果汁生产中的影响：影响出汁率，使果汁浑浊 植物细胞模式图 （二）果胶酶：指分解果胶质的多种酶的总称。 1、成分:包括多聚半乳糖醛酸酶，果胶分解酶和果胶酯酶等 2、作用: 能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层。使榨取果汁变的更容易。 而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变的澄清。 1、酶的活性：是指酶催化一定化学反应的能力。 2、酶活性的高低：可用在一定条件下酶所催化的某一化学反应速度来表示 酶的反应速度常用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或生成物的增加量来表示。 酶活性单位U：1U表示一个酶活性单位，指标准状态下（温度为25℃，其他反应条件如PH等均为最适情况），1 min使1ug分子作用物发生转变的酶量。 二、酶的活性与影响酶活性的因素 酶活性受pH值影响的示意图 3、酶活性的影响因素：温度、pH和酶的抑制剂等。 （1）温度对酶活性的影响 酶活性受pH值影响的示意图 （2）pH 对酶活性的影响 （3）酶的抑制剂：某些物质能抑制酶的活性 温度、PH、和酶的抑制剂都会影响酶活性，果胶酶也如此。本课题要探究温度、PH对果胶酶活性的影响。 酶的提取一般选择在低温和适合的pH下进行，有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。例如，从植物材料中提取果胶酶就是在低温、偏酸性的提取液和NaCl作激活剂的条件下进行的。 （三）果胶酶的用量。 生产果汁时,为了使果胶酶得到充分的利用,节约成本,需要控制好酶的用量。在本课题中，在探究了果胶酶催化反应的最适温度和最适PH的基础上，还要进一步探究对于一定量的苹果泥，使用多少果胶酶最合适。 二、实验设计 （一）探究温度和PH对果胶酶活性的影响 1、实验流程 制备苹果泥→设置一系列具有梯度的温度和pH→加入果胶酶反应一段时间→过滤果汁 2、该实验的自变量是温度或pH，因变量是酶的活性，检测因变量是通过测定果汁的体积或澄清度来实现的（果肉出汁率、澄清度与果胶酶活性成正比）。 3、果胶酶活性受温度（ＰＨ）的影响，在最适温度（最适ＰＨ）下，其活性最高。 4、温度对果胶酶活性的影响 操作方法：在一恒定PH下通过设置温度梯度来确定酶催化反应的最适温度。 流程示意图： 记录表格： 5、pH值对果胶酶活性的影响 操作方法：在一恒定温度下通过设置pH值梯度来确定酶催化反应的最适pH值。 流程示意图： pH值 5 6 7 8 9 果汁量/ml 记录表格： （二）探究果胶酶的用量 1、两种设计方案：（自变量的控制） 第一种可采用同浓度不同体积的果胶酶溶液;第二种可采用同体积不同浓度的果胶酶溶液；设计对照实验，其他无关变量保持一致。 2、实验流程：同体积不同浓度的果胶酶溶液 （1）准确称取纯的果胶酶1,2,3,4,5,6,7,8,9(mg)配制成相等体积的酶的水溶液，取等量放入9支试管中，依次编号1—9号;制取苹果泥45克，分别等量装入9支试管，每试管5克，依次编号为1—9号 （2）将上述试管放入37℃恒温水浴中平衡内外温度 （3）一段时间后将不同浓度的果胶酶分别迅速与各试管的苹果泥混合，放入恒温水箱中。 （4）不断搅拌，约20分钟后，过滤并测量果汁。 3、实验结果分析说明：如果随着酶浓度的增大，过滤得到的果汁的体积也增加，说明酶的用量不足；当酶的浓度增大到某个值后，再增加酶的用量，过滤得到的果汁的体积不再改变，说明酶的用量已经足够，这个值就是酶的最适用量。 1、在混合苹果泥和果胶酶之前，将果泥和果胶酶分装在不同的试管内恒温处理:保证果泥与果胶酶混合时温度相同，避免混合时影响混合物的温度，从而影响果胶酶活性的问题. 2、在探究温度或pH的影响时，需要设置对照，不同的温度之间或pH，就可以作为对照—这种对照称为相互对照 3、果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积大小反应了果胶酶的催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下，果胶酶的活性越大，苹果汁的体积就越大 4、制作苹果泥时，可先将苹果切成小块放入榨汁机中，加入适量的水后再进行搅拌，如果用橙子做实验，不必去掉橙子皮； 5、探究不同pH对果胶酶活性的影响，反应液中的pH可通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调节； 6、在