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第一章 1、tRNA二级结构特点：单链 三叶草叶形 四臂四环 2、260nm光吸收的应用： ①DNA或RNA的定量：RNA浓度（ug/mL）=X稀释倍数 DNA浓度（ug/mL）=X稀释倍数 式中：OD260为260nm波长处光密度值；L为比色杯的光程，一般为1cm；0.022为每毫升溶液含1微克RNA的光密度； 0.02为每毫升溶液内含1微克DNA钠盐时的光密度。 ②.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 3、生物学中心法则： 4、DNA分子的一级结构：DNA分子中核苷酸的排列顺序叫做DNA的一级结构，简称为碱基序列。 5、DNA碱基组成及结构特点：①同一生物的不同组织的DNA碱基组成相同； ② 同一种生物DNA碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变； ③ 几乎所有的DNA，无论种属来源如何，其腺嘌呤摩尔含量与胸腺嘧啶摩尔含量相同［A］ =［T］，鸟嘌呤摩尔含量与胞嘧啶摩尔含量相同［G］ =［C］，总的嘌呤摩尔含量与总的嘧啶摩尔含量相同［A］＋［G］=［C］＋［T］。 ④不同生物来源的DNA碱基组成不同，表现在A＋T/G＋C比值的不同。这些结果后来为DNA的双螺旋结构模型提供了一个有力的佐证。 碱基当量定律:双链DNA中，A与TG与C碱基的摩尔比接近于1的规律 分子杂交3种方法： Southern 杂交 Northern 杂交：步骤①凝胶电泳分离RNA②转印至硝酸纤维薄膜③ 加入RNA探针并杂交④洗脱未杂交探针⑤放射显影，研究结果 Western 杂交 第二章 Pro二级结构 概念蛋白质的二级结构是肽链主链不同肽段通过自身的相互作用形成氢键，沿某一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构，因此是蛋白质结构的构象单元，主要有-螺旋 、-折叠 、 ?-转角和无规卷曲 等 螺旋 特征：（1）多肽链主链骨架围绕一个中心轴一圈又一圈地上升，从而形成了一个螺旋式的构象，每一圈包含3.6个氨基酸残基，每圈螺距0.54nm，每个氨基酸残基沿轴上升0.15nm，绕轴旋转100°。（2）相邻的螺旋之间形成链内的氢键（3）与α-碳原子相连的R侧连，位于α-螺旋的外侧，对α-螺旋的形成和稳定性有较大的影响。 （4）α-螺旋有左手和右手之分。天然蛋白质中的α-螺旋绝大多数都是右手螺旋。 3、aa等电点：对某种氨基酸来讲，当溶液在某一特定的pH时，氨基酸以两性离子形式存在，正电荷与负电荷数相等，净电荷为零，在直流电场中，既不向正极移动，也不向负极移动，这时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。在pI时，氨基酸的导电率最低，溶解度最小，容易发生沉淀。 4、盐析的机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。常用的中性盐：主要有硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁、氯化钠和磷酸钠等。其中应用最广的是硫酸铵。 5、亲和层析：将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。 ？6、SDS电泳用途及指示剂：测量蛋白质相对分子质量；十二烷基硫酸钠（SDS） ?7、比较肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，并简单说明。 第三章 酶的活性中心：是指酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的基团所构成的微区。 ？2、共价修饰的调节机制： ？3、叠构调节概念： 米氏常数：Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L。米氏方程式 凡是使酶的必需基因或酶的活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全丧失活性的物质，叫酶的抑制剂 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍ES复合物的形成，使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 抑制剂不与酶结合，只与ES复合物结合。当反应体系中存在反竞争性抑制剂时，不仅不排斥E和S的结合，反而增加了二者的亲和力；这与竞争性抑制作用恰巧相反，故称为反竞争性抑制用。 磺胺类药物的抗菌机理： ？8、底物动力学 第五章 糖类、脂肪、蛋白质等有机物质在细胞中进行氧化分解生成CO2和H2O并释放出能量的过程称为生物氧化。又称细胞氧化或细胞呼吸。 生物氧化过程中，从代谢物上脱下的氢经过一系列按一定顺序排列的递氢体和递电子体的传递，最后传至分子氧而生成水，这种氢和电子的传递体系叫电子传递链又称呼吸链。 呼吸链组分及功能： 组分：黄素蛋白、铁硫蛋白、泛醌、细胞色素。它们都是疏水性分子。除泛醌外，其他组分都是蛋白质，通过其辅基的可逆氧化还原传递电子。 氧化磷酸化的偶联部位： 复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ 根据自由能变化和P/O比值 ⊿Go=