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- 2016-12-09 发布于重庆
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5体外分析技术(阅读)
体外分析技术 体外分析技术分类 放射免疫分析法 免疫放射分析法 非放射性标记免疫分析技术 放射免疫分析法 Radioimmunoassay,RIA 基本原理 基本方法 质量控制 基本原理 利用特异抗体与标记抗原和非标记抗原的竞争结合反应,通过测定放射性复合物量来计算出非标记抗原量的一种超微量分析技术。 基本试剂 抗体:高亲和力、高特异性、高滴度 标记抗原 (1)比活度和放化纯度必须足够高,以保证分析的灵敏度 (2)半衰期不能太短,使之有足够长的寿命以完成整个分析过程 (3)不改变原有抗原的特性(特异性、亲和力、免疫活性等) 标准品 RIA操作的基本步骤 加样 孵育 分离结合与游离部分 测定放射性 数据处理,打印报告 废物处理 复合物和游离抗原的分离 抗原抗体在液相环境中起反应,终止反应时用一定方法收集复合物测量放射性 :双抗体沉淀法,聚乙二醇沉淀法、葡萄球菌A蛋白沉淀法、活性炭吸附法、微孔滤膜过滤法等。 预先将抗体吸附在某种固体支持物上,抗原抗体反应就在支持物上进行,反应结束后只需将周围未结合的游离抗原洗去,测定固体支持物上的放射性。 质量控制 质量控制的目的:对分析工作的误差进行经常性的检查,遇有质量异常则及时采取对策,以保证分析误差控制在可接受的范围内,包括实验室内部和实验室间质控两方面。 放射免疫分析误差: 随
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