病毒基本形态_培训课件.ppt

其他 生物制剂：干扰素、干扰素诱生剂、IL-1、TNF等 中草药：黄芪、板兰根、大青叶等 抗病毒感染免疫作用维持时间 终身免疫 有明显病毒血症 全身感染 抗原性单一稳定 短暂免疫 无明显病毒血症 局部感染 抗原性多变 本章小结 1、病毒的基本特征 2、病毒的形态、结构 3、病毒的增殖过程 4、病毒的感染与免疫 5、病毒的诊断与防治 预习提纲 1、引起呼吸道感染的病毒主要有哪些？ 2、流感病毒的抗原结构是怎样的？ 3、引起流感大流行的原因是什么？ 4、麻疹病毒与流感病毒有何不同？ 医学全在线网站 * * * 病毒在细胞内必须脱去衣壳，其核酸方可在宿主细胞中发挥指令作用。多数病毒在穿入时已在细胞的溶酶体酶作用下脱壳并释放出病毒的基因组。少数病毒的脱壳过程较复杂。这些病毒往往是在脱衣壳前，病毒的酶已在起转录mRNA的作用。 * 早期病毒基因组在细胞内进行转录、转译需先合成非结构蛋白质，即必须的复制酶和转录、转译一些抑制细胞核酸与蛋白质合成的酶以阻断宿主细胞的正常代谢。然后根据病毒基因组指令，复制病毒的核酸，合成结构蛋白质与一系列的非结构蛋白质。这一阶段并无完整病毒可见，也不能用血清学检测出病毒的抗原，因此曾被称为隐蔽期。这一生物合成阶段的详细过程是通过用生物化学、分子生物学及标记核酸等技术研究的实验结果，综合分析所获得。 病毒基因组有不同类型。在生物合成阶段，主要根据基因组转录mRNA及转译蛋白质的不同分成6大类型：即双链DNA病毒、单链DNA病毒、单正链RNA病毒、单负链RNA病毒、双链RNA病毒及逆转录病毒。 * * * * 细胞病变效应：病毒在细胞内增殖，可引起不同的结果，有的细胞完全被破坏，有的只有轻微的病变，或无可见的变化，由病毒引起的细胞病变，称CPE。往往随病毒种类和细胞类型不同而异。这些变化在一定条件下比较恒定。常见的为细胞变圆，坏死，溶解或脱落等。腺病毒 细胞变圆，并堆积成葡萄状，麻疹可形成多核巨细胞或融合细胞。 包涵体：某些病毒感染的细胞中，在光镜下，可见胞浆或核内出现嗜酸或嗜碱性染色，大小和数量不同的圆形或不规则的团块结构，称为 inclusive body。狂犬，baozhi，嗜酸；麻疹，核或胞浆，嗜碱。 * * * 病毒感染的检查 方法和防治原则 一、病毒感染的检查方法 1、标本采集与送检 2、病毒的分离培养与鉴定 3、病毒感染的快速诊断 1、标本采集与送检 标本采集： 早期；不同病变取不同标本 标本处理： 无菌操作；杂菌标本+抗生素 冷藏速送： 快速送检；冷藏（-70 0C） 血清学标本： 取双份血清，效价升高4倍有诊断价值 2、病毒的分离培养与鉴定 病毒的分离培养 动物接种（Animals） 鸡胚培养（Embryonated eggs） 组织细胞培养（Organ and tissue culture） 病毒的鸡胚接种示意图 尿囊腔接种 羊膜腔接种 流感病毒 流感病毒 尿液 羊水 血凝及血凝抑制试验 鉴定病毒 流感病毒+红细胞 血凝 流感病毒+特异抗体 血凝被抑制 初次 再次 鸡胚接种 常用的细胞培养 病毒增殖指标 细胞病变效应(Cytopathic effect, CPE) 包涵体（Inclusion Bodies） 多核巨细胞 病毒的鉴定 正常细胞 CPE 狂犬病毒包涵体（Negri body） 巨细胞病毒包涵体 三、病毒感染的快速诊断 1、形态学检查 2、检查病毒性抗原 3、检查病毒抗体 4、病毒核酸的检测 光镜—大病毒、包涵体 电镜—直接电镜、免疫电镜 免疫标记技术—荧光素、放射性核素、酶 ELISA——IgM 核酸杂交技术 Southern、Nouthern PCR 光镜检查法 用光学显微镜直接检查某些细胞包涵体 巨细胞病毒包涵体 麻疹病毒感染形成多核巨细胞 狂犬病脑组织神经细胞胞质中包涵体 （Ｎegri 氏小体）等 形态学检查 电镜检查法 用电子显微镜观察病毒颗粒的形态， 适于检查含高浓度病毒的标本 用于甲型肝炎病毒、轮状病毒等的检测 近年来利用特异性免疫血清与标本混合 孵育后，用免疫电镜法检测，提高阳性率 用于轮状病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、疱疹病毒等的检测 形态学检查 免疫荧光法（IFT） 可快速、早期检测难以培养的病毒， 如流行性出血热的汉坦病毒 上呼吸道上皮细胞内的流感病毒、腺病毒和呼吸道融合病毒（ＲＳＶ），疱疹水疱液中单纯疱疹病毒抗原 婴幼儿腹泻中的轮状病毒抗原等 检查病毒性抗原 免疫荧光法示