(一)限制性核酸内切酶----“分子手术刀” (1)来源: (2)特点: :具有专一性, 表现在: 一、识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列, 二、切割特定核苷酸序列中的特定位点 (3)作用实质 使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(切割DNA分子) 例、下列关于限制酶的说法正确的是( ) A.限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中少 B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键 (二)“分子缝合针”——DNA连接酶 (三)“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 ⒈载体需要的条件: ⑴有1~多个限制酶切点 ⑵对受体细胞无害 ⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 ⑷有某些标记基因,便于筛选 (5)结构简单,大小适中。 ⒉常用运载体: ⑴细菌的质粒 ⑵噬菌体或某些动植物病毒 1、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库 2、将目的基因导入动物细胞 ①方法:显微注射法 ②程序: 对基因工程步骤的几点说明 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,只是前者切开,后者连接。 (2)要想从DNA上切下某个基因,应切两个切口,产生四个黏性末端。 (3)获取目的基因、切割运载体需要用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。 (4)将目的基因导入受体细胞,没有涉及碱基互补配对。 (5)动物一般用受精卵作为受体细胞;植物一般用体细胞作为受体细胞,再通过植物组织培养方式形成新个体;微生物常用不致病的大肠杆菌作为受体细胞。微生物常被用做受体细胞的原因是其具有繁殖快、代谢快、目的基因产物多的特点。 下列叙述符合基因工程概念的是( ) A.B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 B 2.通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质,下图表示这一技术的基本过程,在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G↓GATCC—,请回答下面的问题。 DNA连接酶 限制性核酸内切酶 (3)人体蛋白质基因之所以能连接到羊的染色体DNA中,原因是_________________________________________________, 人体蛋白质基因导入羊细胞时常用的工具是 __________________________________________________。 (4)此过程中目的基因的检测与表达中的表达是指___________________________________________________。 (5)你认为此类羊产的奶安全可靠吗?理由是什么? __________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 安全。因目的基因导入受体细胞后,控制合成的人奶蛋白质成分没有改变(或不安全,因目的基因导入受体细胞后,可能由于羊细胞中某些成分的影响,合成的蛋白质成分会发生一定的改变) 具有相同的物质基础和结构基础(有互补的碱基序列) 细菌质粒或动物病毒 人体蛋白质基因在羊体细胞内控制合成人体蛋白质 1.(2013·高考江苏卷)现有小麦种质资源包括:①高产、感病; ②低产、抗病;③高产、晚熟等品种。为满足不同地区及不同环境条件下的栽培需求,育种专家要培育3 类品种;a.高产、抗病:b.高产、早熟;c.高产、抗旱。下述育种方 法可行的是(多选)( ) A.利用①、③品种间杂交筛选获得a B.对产品③进行染色体加倍处理筛选获得b C.a、b 和c的培育均可采用诱变育种方法 D.用转基因技术将外源抗旱基因导入③中获得c CD 当堂训练 2.(2013·高考上海卷)研究者从冰川土样中分离获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株,为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株,最可行的做法是( ) A.用紫外线照射青霉菌菌株,再进行筛选 B.将
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