第十五章 免疫缺陷动物_幻灯.pptVIP

5. 移植瘤的转移 肿瘤分化程度：肿瘤分化程度越低，浸润转移越明显，转移发生越早。 接种途径与部位：腹腔接种一般转移率高于皮下，常位接种转移更接近于原肿瘤在人体内转移的情况。 环境因素：SPF环境中带瘤裸鼠淋巴结比普通环境转移率高、转移快。 宿主状态：遗传背景、周龄、饲养条件及免疫状态直接影响肿瘤转移的发生。 第五节 联合免疫缺陷动物 一、严重联合免疫缺陷小鼠(C·B17-Prkdcscid/J，或BALB/c scid) 1983年由美国Fox chase癌症中心于C.B-17Icr近交系中发现，突变基因scid位于16号染色体。 该突变基因造成编码Ig重链和TCR的基因重排异常，抑制B-cell和T-cell前体的正常分化。 C·B-17Icr为携带来自C57BL/ka小鼠的免疫球蛋白重链Igh-1b等位基因的 BALB/cAnIcr的同源近交系。 纯合子血清中无免疫球蛋白，淋巴结、胸腺变小，缺乏体液、细胞免疫功能。饲养于SPF环境中。 SCID小鼠的渗漏现象，小鼠1g血清中免疫球蛋白高于1μg/ml即为“渗漏”。 在严格的SPF环境中，SCID小鼠可存活1年以上 二、scid-hu小鼠 通过移植人免疫组织或免疫细胞，可使SCID小鼠具有人类部分免疫系统，称为SCID-hu小鼠。 1. SCID-hu免疫重建的机制: SCID小鼠体内T、B细胞自身不能分化成特异性淋巴细胞，但小鼠体内淋巴细胞分化的微环境正常，能接受人体正常组织的移植成为嵌合体小鼠。 1988年Mosier首次将人外周血淋巴细胞及人胎肝移植于SCID小鼠的皮下和肾包膜下获得免疫重建的成功。 目前已有人胚胎组织如骨髓、胸腺、肝、淋巴结，成年人外周血淋巴细胞、骨髓、脾进行移植。 由于成年人外周血淋巴细胞比人胚胎组织、脾更易获得，PBL-hu-SCID模型研究更多。 PBL-hu-SCID小鼠脾检出的人淋巴细胞达80-90%，移植6个月后，80%小鼠可从外周血中检出人淋巴细胞。 Engraft human cells HIV Human PBL + Treatment Study outcomes Peritoneal or Spleen Cells FACS analysis Immunhistochemical staining Blood for viral burden by PCR NOD/SCID Mouse Hybrid human-mouse huPBL- NOD/ SCID system 2. SCID-hu存在的问题: 重建成功率达不到100%，不同实验室研究结果以及同一实验室不同小鼠个体间免疫重建的程度存在明显差异。 SCID小鼠体内淋巴细胞的功能不能标准化。 不同类型淋巴细胞组成的移植物移植于SCID小鼠，T细胞易获得免疫重建，活性B细胞数目有限。 易发生移植物抗宿主反应导致小鼠死亡。 免疫重建方法不尽统一，效果不同，影响该模型的标准化及重复性。 三、NOD·CB17-Prkdcscid/J，也称NOD scid，或NOD SCID Jackson Lab 用非肥胖糖尿病小鼠NOD/Lt（♀）与SCID小鼠（♂）杂交，其F1代（♂）继续与NOD/Lt（♀）回交10代，降低了NK细胞的活性，获得杂交双突变小鼠纯合子。 ① 相比B6和C系遗传背景，该品系小鼠渗漏发生率更低。 ② 终生不发生胰腺炎和糖尿病，可作为NOD/Lt的无糖对照品系。 ③ 胸腺淋巴发生病率高，平均寿命8.5个月。 四、虫蛙小鼠(motheaten mice) 1965年发现于C57BL/6J的突变，突变基因me位于第6号染色体，寿命不超过8周。 出生后2天内出现皮肤脓肿，有严重联合免疫缺陷。 对胸腺依赖和非依赖抗原均无反应。 对T、B细胞分裂素的增殖反应严重受损。 细胞毒细胞和NK细胞活性低。 伴有自身免疫的倾向，免疫复合物沉积于肾、肺、皮肤。 C57BL/6J-me在1-2日龄表皮可见嗜中性白细胞集聚，表皮色素呈斑点状，故称虫蛙小鼠。 第六节 其他免疫缺陷动物 一、性连锁免疫缺陷小鼠 起源于CBA/N，毛色为野鼠色，B细胞功能缺乏，基因符号xid，位于X染色体。 雌性纯合子与雄性杂合子对胸腺非依赖性抗原（如葡聚糖、肺炎球菌脂多糖、DNA）没有体液免疫。 B细胞对B细胞分裂素缺乏反应，分泌IgM和IgG的B细胞减少， IgM和IgG含量降低，但T细胞功能正常。 移植正常鼠骨髓到xid宿主，B细胞缺损可以恢复。 该小鼠用于研究B细胞的