实验三-离心技术及物质代谢实验-xuxia课件.pptVIP

实验内容 离心技术 邻甲苯胺法测血糖含量 糖酵解中间产物磷酸丙糖的鉴定 酶法测定血浆胆固醇（下午） 二、胰岛素对血糖含量的影响及测定 实验目的： 通过实验方法证实胰岛素对血糖含量的降低作用，即检测家兔注射胰岛素前后血糖浓度的改变. 掌握邻甲苯胺法测定血糖浓度。 实验原理： 1.胰岛素降血糖的机理： 1)促进肌肉、脂肪组织对葡萄糖的通透性，促进葡萄糖进入这些细胞； 2)糖原合成↑,糖原分解↓； 3)糖有氧氧化↑； 4)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶合成↓→糖异生↓； 5)激素敏感性脂肪酶↓→脂肪动员↓。 2.血糖含量的测定： 1.??1）取试管四支，按下表操作　 2）混匀，置沸水浴中加热10分钟，取出立即置冷水中冷却． 3）用630nm波长，以空白管校正吸光度为0，分别测定各管吸光度值． 4）计算： 目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。 注意问题 胆固醇含量测定：4个组做空白和标准管，样品管每个组都做。测吸光度值时把空白管和标准管放入分光光度计，只换样品液即可。 实验注意事项： 试管、移液管洗干净； 加入的试剂正确； 混匀； 成腙反应前，溶液必须先碱化并在室温放置10min，目的是使磷酸丙糖中的磷酸基水解脱去，生成的颜色比较稳定。 血清胆固醇测定（酶法） 【实验目的】 1.了解胆固醇氧化酶法测定血清胆固醇的原理。