7.细菌遗传4课时课件.ppt

① DavisU形管分开双亲无野生型，不分开有野生型，说明是接合或性导重组。 ② DavisU形管分开双亲后有野生型，可能是转导或转化重组。添加硝基苯或DNA酶后无野生型产生说明是转化重组，反之为转导重组。 ③添加血清前有野生型、添加后无野生型为转导重组。 五、转导重组与作图 (二)转导、性导、转化与接触重组的区别 (三)普遍性转导 (general transduction) 五、转导重组与作图 1、普遍性转导：phage传递供体基因组任一基因，并在受体表达 2、转导过程 侵染供体→降解染色体→病毒DNA包装→误装转导子→释放再侵染→部分二倍体→①保存不复制，称流产；②整合，表达供体性状； ③降解，转导基因丢失。 ①可转导供体基因组内任一基因 ②转导频率低，多为3×10-5 沙门氏菌染色体约2-3千个基因，噬菌体头部能装20-30个基因，占1%；有转导能力的沙门氏菌约0.3%。 所以，基因普遍性转导频率= 3×10-5 。 (三)普遍性转导(general transduction) 3、普遍性转导特点 4、并发转导(cotransduction) 2个或多个基因同时转导称为并发转导、共导 共导率愈高，连锁基因间的距离愈近，反之则反。因距离愈远的基因不易在一个短片断上而共导率低。 据此，并发转导广泛应用于细菌基因作图。 五、转导重组与作图 1、三 因子共导试验（three factor cotransduction ） 试验 P1 phage浸染 E.coli wt,再浸染E.coli(leu-thr-azir ) leu-thr共导成活 2% 加leu+培养基成活者 加azi死 leu -azi共导 50% 鉴定 thr-leu共导成活 3% 加thr+培养基成活者 加azi死thr -azi共导 0% 2、基因定序 ①鉴定Ⅰ中，leu与thr共导率低(2%)，但与zai共导率高(50 %)，则leu离thr的距离比azi远。 有2种排列方式： leu - azi –thr 或 thr——leu- azi 。 ②鉴定Ⅱ中，leu与azi共导率为0，则thr与azi不可能共导，所以，排序只能是thr——leu- azi 。 (四)普遍性转导作图（transducting mapping） 五、转导重组与作图 3、基因定距离 五、转导重组与作图 ⑴重组率计算公式 两个紧密连锁基因最大并转导率为1，不能共导的两个基因并导率为0。经推导，同一染色体上两个基因之间的物理距离计算公式为： d=连锁基因间的物理距离 L=转导噬菌体DNA平均长度 X=两个基因的并转导率 ⑵计算重组率 Rf(thr-leu)=20(噬菌体基因组长度)×(1-0.031\3) =13.8 Rf(thr-ai)=20× (1- 0.51\3)=4.1 4、作图 thr leu azi | 13.8 | 4.1 | (四)普遍性转导作图（transducting mapping） 共导子与重组子频率成正比，共导子中频率最小的重组子频率也必定最小，用双交换型最少可确定中央基因。 1、基因定序原理 (五)共导子频率进行基因作图 五、转导重组与作图 2、噬菌体转导试验 供体：E.coli F+（trpA+supC+pyrF+) P1 phage转导 受体：E.coli F-（trpA-supC-pyrF-） supC+标记选择 603个共导子如下。据四交换最少进行基因定序：F和C居中时与结果不符见下， A居中时与结果相符，则A居中央。 C+ F+ A+ C- F- A- C-F+A-最少 A+ C+ F+ A- C- F- A-C+F-最少 3、用共导子频率定距离 (五)共导子频率与基因作图 五、转导重组与作图 supC trpA pyrF 7.4