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第十二章 DNA的复制和修复 遗传信息传递的 中心法则 目 录 第一节 DNA的半保留复制 DNA的半保留复制的概念 DNA的半保留复制实验依据 复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图(Caims实验) 原核生物DNA聚合反应有关的酶类 DNA聚合酶催化的链延长反应 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 DNA聚合酶的3′- 5′外切酶水解位点 DNA聚合酶5′- 3′外切酶活力 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能 连接酶连接切口 DNA的双向和单向复制 大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 大肠杆菌复制体结构示意图 大肠杆菌染色体复制的终止 复制叉处前导链和随后链同时合成的工作模型 复制的忠实性 DNA聚合酶的校对功能 DNA聚合酶的校对功能 起始时以RNA作为引物的作用 真核细胞DNA复制的特点 真核生物的DNA聚合酶 端粒酶(telomerase) 端粒合成的一种模型 真核和原核DNA细胞复制比较 第二节 DNA的损伤与修复 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 DNA的损伤和切除修复 DNA的重组修复 SOS反应的机制 第三节 DNA的突变 DNA突变的类型 第四节 逆转录作用 逆转录过程中cDNA的合成 逆逆转录病毒的生活周期生活周期 第五节 DNA的遗传重组 碱基丢失 碱基缺陷或错配 结构缺陷 切开 核酸内切酶 核酸外切酶 切除 DNA聚合酶 DNA连接酶 AP核酸内切酶 核酸外切酶 切开 切除 修复 连接 糖苷酶 插入酶 碱基取代 胸腺嘧啶二聚体 复制 核酸酶及重组蛋白 修复复制 DNA聚合酶 DNA连接酶 重组 未诱导的细胞 靶基因 lexA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 recA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 (?40个不同的位点被阻遏) LexA(阻遏物) RecA(辅蛋白酶) 靶基因表达 lexA靶基因表达 但产物被分解 recA大量表达 RecA促使分解LexA 诱导的细胞 单链DNA ATP DNA分子中的核苷酸序列发生突然而稳定的改变,从而导致DNA的复制以及后来的转录和翻译产物随之发生变化,表现出异常的遗传特性,称为DNA的突变。它包括由于DNA损伤和错配得不到修复而引起的突变,以及由于不同DNA分子之间的交换而引起的遗传重组。 二、诱变剂的作用 ?碱基类似物(base analog) ?碱基修饰剂(base modifier) ?嵌入染料(intercalation dye) ?紫外线(ultraviolet)和电离辐射(ionizing radiation) 一、突变的类型 ?碱基对的置换(substitution) ?移码突变(framesshift mutation) -T-C-T-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-A-C-G-A-C-A-T-G-C- 转换 野生型基因 -T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-T-G-A-C-A-T-G-C- -T-C-T-T-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-A-A-G-A-C-A-T-G-C- 颠换 碱基对的置换(substitution) 移码突变 (framesshift mutation) -T-C-T-C-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-A-G-C-G-A-C-A-T-G-C- 插入 -T-C-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-G-A-C-A-T-G-C- 缺失 A T 一、概念 二、逆转录酶 三、病毒逆转录过程 四、逆转录的生物学意义 扩充了中心法则 有助于对病毒致癌机制的了解 与真核细胞分裂和胚胎发育有关 逆转录酶是分子生物学重要工具酶 三种功能 依赖DNA指导下的DNA聚合酶活力 依赖RNA的DNA聚合酶活力 核糖核酸酶H活力 以RNA为模板合成DNA,这与通常转录过程中遗传信息从DNA到RNA的方向相反,故称为逆转录作用。 依赖RNA的DNA聚合酶 核糖核酸酶H活力 依赖DNA的DNA聚合酶 本章重点介绍遗传中心法则和DNA的半保留复制以及逆转录的过程和机理,对DNA的损伤和修复、突变和重组作一般介绍。 思考? DNA是绝大多数生物体遗传信息的载体,继1953年Watson Crick提出DNA双螺旋结构模型后,1958年,Crick提出了“中心法则”(Central dogma)揭示了遗传信息的传递规律。 蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA 生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺
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