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蘭的大量繁殖──植物組織培養的另一應用 【摘要】蘭的各種組織都可以培養，生長點組織培養法更能大量繁殖蘭花。 在前三篇文章裏，我們已經介紹了植物組織培養的基本原理和其應用範圍，本篇我們想領引讀者到另一奇妙的園地－蘭的大量繁殖。 蘭的大量繁殖方法的發現共有兩次，第一次是1922年發現無菌播種法，第二次是1962年發現生長點組織培養法。因前者之發現得進行多數有效的品種改良，而後者之發現得以實現某一優良品種的大量繁殖，故已經引起蘭的革命性的大量企業栽培。這兩次的大發現都是應用極為高度的科學知識，且都與組織培養有關。 蘭的無菌播種繁殖 「偷工減料」的蘭種子 蘭的種子很小，在1立方公分的盒子裏可以放上1～3萬個種子。祇有象徵性的種皮包著約一百個細胞所構成的一團未分化的「胚」，它缺少一般種子具備的胚乳或子葉等貯藏養份的組織或器官，更缺少已分化完成的幼根及芽頂等。因此與其說是種子，不如稱它為未成熟的胚。種子發芽需要很多的能，是由種子內所貯藏的油或澱粉氧化而來。那麼沒有貯藏養分的未成熟胚怎能發芽呢？這就必須靠蘭菌了。 蘭菌與蘭種子的關係 蘭菌為一種低等的真菌（fungi），在蘭生長的地方都有，它們專找蘭種子共生。所謂共生是互相幫忙，因此蘭菌由蘭種子得到一種在別處得不到的生活必需品，但一方面也給蘭種子某些方便。究竟蘭菌自蘭種子得到甚麼呢？這個問題不比蘭種子自蘭菌處所得的東西重要，所以就沒人去研究。相反的，蘭種子由蘭菌處得到了甚麼東西，就是很重要的問題了。從所得的資料可獲知，當蘭種子掉在地上或樹皮上，吸收水份後便分泌一種誘引蘭菌的分泌物，因此蘭菌便很容易找到蘭種子。菌絲的一部份被「請入」種子中，而被蘭的細胞消化掉。蘭因此得到大量的碳水化合物，及一點點的氨基酸，另外，很可能得到一些生長激素例如auxin及cytokinin之類。 蘭媽媽生下天文數目的早產兒，幸虧蘭菌幫忙，使其正常發芽，等到長成芽球（protocorm），其表面形成葉綠素之後，便能自給了。人工播種，是把蘭種子播在蘭根附近，祇要想辦法使種子不被水流出，不被細菌吃掉，就有發芽的一天。但是，誰能保證那麼小的種子不被水流失，不被細菌吃掉？ 一個大發現：蔗糖可代替蘭菌 有人把種子消毒乾淨之後播在洋菜培養基上，再接種蘭菌，這樣可以保證不被水流失，也不被雜菌吃掉；為了使蘭菌生存，必須在培養基裏放些糖，蘭菌生長，蘭種子也發芽。美國康乃爾大學納得遜（Knudson）教授在1922年發現糖可完全代替蘭菌，這當然是在完全無菌的狀態下才能成立，因為含糖培養基是細菌的天堂。前面說過蘭菌除了供給蘭胚碳水化合物之外，可能還有氨基酸及生長激素，因為無菌培養中糖可完全代替蘭菌，那麼不管蘭菌是否提供氨基酸及生長激素，看來它倆對蘭種子的發芽並非必需的了。現在來談談無菌播種法。 無菌播種法 蘭花的無菌播種法有兩個要點，即培養基的配製方法及如何除去種子表面的微生物，請看下文中的細節： 一、培養基的配方：納得遜在1922年所發表的培養基配方如下：瀏覽原件】Knudson在1946年發表的改良培養基配方為： 瀏覽原件】 也有讓一般不喜歡使用天平等精密器具的養蘭家的簡單實用的配方，例如Chang A.C.於1953年發表的： 瀏覽原件】 Curtis, J. 1943年在美國蘭藝學刊（A. O. S.）發表Cymbidium專用的培養基： 瀏覽原件】 以上之培養基pH值為5～5.5之間，經120℃高壓殺菌10～15分鐘。 1961年，Kano為了再簡化培養基的配方，找到美國Hydroponic公司出品的王牌混合肥料Hyponex為基本培養基，可得較好的效果。Hyponex成份不明（為該公司最高機密），Kano的發現因此在學術上無甚意義，但在實用價值上發揮了很大效果。茲將他在A. O. S.雜誌35卷第5號發表的培養基介紹於下： 瀏覽原件】 二、種子的消毒 一般均用含氯水，漂白粉1克溶在140ml水裏，取上面的澄清液便可。另一種氯水叫Antiformin，為sodium hypochloride solution之商品名稱，沖淡至0.1～1％使用。1～3％的雙氧水亦可，將種子放進小瓶子內，取少量殺菌液以姆指壓住瓶口激烈振動5分鐘後以濾紙過濾，種子便留在濾紙上，再經無菌水洗兩次，最好連無菌水一起倒入培養基上。 蘭不用種子也可以繁殖 除了用種子外，蘭花的一些特殊組織如「前未成熟胚」、未受精的子房、花梗上的隱芽、葉尖、根尖、葉基等都可以用組織培養的技術來繁殖更多的蘭花。這個領域真是非常奇妙的。 「前未成熟胚」的培養 蘭媽媽是非常懂得保養的，有花粉掉在柱頭上，才讓胚珠開始發育。如未受粉，子房就不發育，和花瓣一起掉落，乾淨俐落，不損身體。 蘭自受粉到受精要經過很長的時間，較快的蝴蝶蘭也得經過一個多月，三個多月果實才成熟。嘉多麗雅蘭沒人知道