肺炎支原体感染儿童血清免疫相关指标的变化及临床意义.docVIP

肺炎支原体感染儿童血清免疫相关指标的变化及临床意义 　　[摘要] 目的 探讨肺炎支原体感染儿童血清免疫相关指标的变化及临床意义。方法 选择肺炎支原体感染患儿30例作为肺炎支原体感染组，健康儿童30例作为对照组。检测两组血清免疫指标水平，分析两组之间的差异。 结果肺炎支原体组IgG水平低于对照组（P0.05），IgM、IgE、IL-18、嗜酸性粒细胞水平高于对照组（P0.05或者P0.01）。肺炎支原体感染患儿血清IL-18水平与IgE 呈正相关（r=0.401，P0.05）。结论 肺炎支原体感染患儿血清IL-18、IgE、IgM和外周血管嗜酸性粒细胞升高，IL-18与IgE呈正相关。 　　[关键词] 肺炎支原体；血清；细胞介素-18 　　[中图分类号] R725.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）08-0104-04 　　肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体，是常见的社区获得性肺部感染的病原体，是介于细菌和病毒之间的一组病原体，肺炎支原体感染多见于婴幼儿和青少年[1]。肺炎支原体发病机制还不十分明确，研究认为，其与机体的免疫存在一定的相关性，患者感染后存在细胞免疫、体液免疫、免疫调节、免疫逃逸、免疫抑制等[2]。也有研究认为支原体感染后导致Ⅲ型超敏反应。本研究主要分析肺炎支原体感染儿童血清免疫相关指标的变化及临床意义，现报道如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 　　选择2012年9月～2013年3月收治的下呼吸道支原体感染患儿30例和健康儿童30例。肺炎支原体组中男16例，女14例，平均年龄（7.9±2.3）岁。纳入标准：①刺激性咳嗽为主要表现，可伴发热或者无发热；② 肺部体征可不显著，部分患者可闻及干啰音或者湿啰音；③肺部影像学检查结果符合肺炎支原体感染的表现；④肺炎支原体抗体阳性；⑤冷凝集实验≥1：32；⑥无免疫性疾病，无关节肿痛、不明原因的发热；⑦近1个月内无感染症状；⑧无长期服用糖皮质激素史或者近期服用糖皮质激素，近期无服用影响免疫调节的药物。对照组30例，男15例，女15例，平均年龄（8.2±3.1）岁，为在我院进行健康体检的儿童。纳入标准：①无免疫性疾病，无关节肿痛、不明原因的发热；②近1个月内无感染症状；③无长期服用糖皮质激素史或者近期服用糖皮质激素，近期无服用影响免疫调节的药物；④ 血常规以及胸部X光检查正常。 　　1.2检测方法及检测指标 　　1.2.1标本制备 采集研究对象空腹静脉血4 mL。非抗凝，3000 r/min离心5 min，取上清液，-20℃保存，待测IgG、IgM、IgA、IL-8。取0.5 mL抗凝，用于测嗜酸性粒细胞。 　　1.2.2 IgG检测 采用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，加1 mL生理盐水进行稀释。分别取2个抗体液1 mL，分别加入10 μL的稀释血清和标准血清，混匀，37℃下水浴，30 min后波长340 nm比浊，读取吸光度。 　　1.2.3 IgA检测 采用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，加1 mL生理盐水进行稀释，分别取2个抗体液1 mL，分别加入稀释血清40 μL和标准血清40 μL，混匀后37℃水浴，30 min后，波长340 nm比浊，读取吸光度。 　　1.2.4 IgM检测 采用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，加入1 mL生理盐水稀释。取抗体液1 mL 2份，分别加入80 μL的稀释血清和80 μL的标准血清，混匀后37℃水浴，30 min后波长340 nm读取吸光度。 　　1.2.5 IgE检测 采用EIA法进行检测。实验前对标本等在室温下进行平衡，高值标本进行稀释，配置洗液。在反应板加入不同浓度的标准品25μL、质控血清以及标本血清25μL。每孔均加入缓冲液100μL，混匀，室温下反应15 min。弃各孔液体，洗液冲洗5次。每孔加酶结合物100μL，混匀，室温下反应20 min。弃各孔液，冲洗5次，拍净残液。每孔加显色液A和B各1滴，置室温下避光15 min，每孔加终止液1滴，混匀，30 min内，波长450 nm读取吸光度，计算对应的浓度。 　　1.2.6 IL-18 检测 采用ELISA方法进行检测。取100 μL待测样板至抗体包被的微孔板中，室温下孵育60 min。洗涤后清除洗涤液，每孔中加耦合液100 μL，室温下孵育60 min。弃孔内容物，洗涤，清除洗涤液后，每孔中加酶作用底物100 μL，室温下孵育30 min。每孔加终止液100 μL。波长450 nm读出吸光度，校正波长620 nm，计算浓度。 　　1.2.7嗜酸性粒细胞计数 取嗜酸性粒细胞稀释液0.38 mL加入试管中，另取10 μL抗凝全血加入试管中，混匀，放置5