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* * 第二节 形态学方法 及其在中医研究中的应用 本节的教学目的和要求: 1.掌握形态学实验研究方法的特点和优势。 2.掌握依据实验研究的不同目的,选择合适的形态学实验技术和综合多种技术。 3.了解形态学的主要方法及其在中医研究中的应用。包括解剖学、病理解剖学方法,组织学、病理学方法,电子显微镜方法。 什么是形态学? ● 形态学是生命科学的基础学科。生命的表现形式为形态、结构与功能相结合的统一体,生命的形态结构的多样性决定了其功能的复杂性,因此探讨生命的形态结构是医学乃至所有生物学科的研究基础。 ● 与教材其它几类实验技术相比,形态学技术的显著特点是形象(直观、实在)——眼见为实,观察和比较实验对象的形态。从肉眼所见的解剖、器官、组织,到借助光镜、电镜看到细胞、分子。 在实验研究中可以观察许多方面,看看中药治疗后在哪些方面起作用。其中形态学是最常用的观察手段。即使在分子生物学迅速发展的今天,也是如此。有许多优点,实在、可靠(受检测技术干扰少、质量容易控制)。比如中药的药效学实验、毒理实验、质量检测等往往采用这些技术。 形态学方法有3个层次:解剖、光镜、电镜。 解剖:肉眼所见,最为基本。比如,肿瘤体积在用药后,有没有减小?骨折经治疗后,接上了没有。这些最基本。而解剖可以回答这样的问题。 但是,想深入细致地看,比如肿瘤中的细胞特征,肉眼看不见,必须借助光镜和电镜。 光镜:通常可以放大100~400倍(范围在50~1600倍)。由于放大,所以要求组织经过处理,最常见的是石蜡包埋、切片、染色。 电镜:通常可以放大500~10000倍。由于放大倍数太大,石蜡切片还不能满足,所以要求特殊的包埋、切片、染色技术。 一、形态学的主要方法 形态学主要有哪些方法? 形态学的主要方法可以概括为3个方面: ① 解剖学、病理解剖学方法(解剖)。 ② 组织学、病理学方法(光镜)。 ③ 电子显微镜方法(电镜)。 (一)解剖学、病理解剖学方法 何谓解剖学? 解剖学是一门研究机体形态结构的重要医学基础学科,属于生物学中的形态学范畴。分类如下: 大体解剖学是指用刀剖割,用肉眼观察机体各器官的形态结构的科学,根据具体研究方法和观察内容的不同,又将其进一步分为系统解剖学和局部解剖学。 系统解剖学主要按照机体各系统来叙述各器官的形态结构。 局部解剖学则是按照机体自然分区如头、颈、胸、腹、四肢等叙述各器官结构的层次排列、毗邻关系、血液供应、神经支配、体表标志和体表投影。 解剖学及其研究方法的发展经历了漫长的历程。西方最早的较完整的解剖学论著当推盖伦(Galen,公元130~201年)的《医经》。现代人体解剖学创始人维萨利(A Vesalius,1514~1564)是西欧文艺复兴时期最伟大的解剖学家,他的《人体构造》,极大地推动了人体解剖学的发展。 我国2000多年前的《黄帝内经》、《难经》也有丰富的解剖记录。宋·宋慈所著的《洗冤录》是我国乃至世界上最早的一部法医解剖学专著,其中较详细地记载了人体体表各部解剖学名称以及全身各部骨的名称、数目和形态等。 何谓病理解剖学? 病理解剖学是研究疾病时机体内所发生的形态结构改变,揭示疾病的病因、发病机制和转归,从而认识和掌握疾病的本质、发生和发展规律,为诊治和预防疾病提供科学的理论基础的一门基础学科。 临床医学除运用各种检验、治疗等方法对疾病进行诊治外,还必须借助于病理学解剖学的研究方法,如活体组织检查、尸体剖验、动物实验等对疾病进行观察研究,以阐明疾病的本质,提高临床诊治水平。 介绍某医院二尖瓣狭窄死亡患者病理解剖案例。 病理解剖学的发展也经历漫长的历史。古希腊名医希波克拉底(Hippocrates,公元前460~公元前377年),首创液体病理学。安东尼·本尼维尼(Antonio Benivieni,1440~1503,佛罗伦萨的外科医生)的著作《疾病隐因》对20例尸体解剖进行了描述,并“试图确定死因和解释临床症状”。因此,本尼维尼被称作病理解剖学之父。到18世纪中叶,意大利医学家莫干尼(Morgagni,1682~1771),根据尸体解剖所积累的资料,创立了器官病理学,标志着病理形态学的研究开端。 解剖学主要有哪些方法? 解剖学的主要方法包括: ① 标本防腐固定方法。 ② 断面解剖方法。 ③ 血管灌注技术。 ④ 淋巴管灌注方法。 ⑤ 数字化“可视人”方法等。 此外,还有: 计
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