人端粒酶催化亞基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定.docVIP

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广东医学院 硕士学位论文 人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定 姓名:贾振华 申请学位级别:硕士 专业:@ 指导教师:彭智 201005 的过度产生和沉积为特征的皮肤纤维增生性疾病。病理性瘢痕的发病机理至今不 甚清楚,但以往大量研究表明瘢痕的过度增生与细胞因子、癌基因和免疫反应等 密切相关。越来越多的研究表明人端粒酶催化亚基??? ????? 基础。 ???產???,然后对质粒进行测序。 ??H??细胞中进行病毒包装、鉴定和滴度测定。 ??τ胦????? ??刈橄俨《局柿??—???玎经质脂体转染??细胞,两周后抽提病毒 ??獠《镜味龋涸嘉?.??? 【关键词】 瘢痕疙瘩;成纤维细胞;??玎;腺病毒;基因治疗 ??????? ????? ?????? ?? ??? ? ? ?? ?????? ????. ????? ?鵦??? ????? ??? ? ???????甊????? ? ??? ?????.? ? ?? ???甌??????? ? ? ?? ????? ??? ????簑?????? ????? ????? ?????瑆?? ?? ????????? ? ??? ???;??? ??? ????????.? ?? ???? ?????琣? ?? ???籥??? ???????—??? ??????? ????? ?? ? ?甌????? ? ??? ???? ? ????????瑆?? ??之?鷇 ?????? ?? ? ?? ??? ?? ??? ????? ????? ??猘???鄔嬲???.?? ?? ?? ??????????? ? ? ? ?甅???? ? 【?????】 ????? ????鏻? ???????? ??】 ???????籄????;?? ???? ?????????????????????????????????????? ? ? ?????.??????...???...?????????????????????.?...???..? ?:、,??...???...??..???????????????????......?????..?...?.........?簘 ?????????.?????????????????????????...?????.?? ?????????????????????????????????????????.? ???? ??????????..??。?????????????????????...????.???? 言 ? 北京时间??年?月?障挛?点?分,瑞典卡罗林斯卡医学院宣布, 将??年诺贝尔生理学或医学奖授予?幻拦?蒲Ъ褽???? ?瓽???和???甋???【,以表彰他们发现了端粒和端粒酶保护染色 体的机理。卡罗林斯卡医学院方面称,这三人“解决了生物学上的一个重大问 端粒酶的重要成分,但研究发现它们的表达与人端粒酶活性无明显相关性,而 人类???原癌基因定位于??区,由?鐾庀宰雍?个内含子组成:第 ?甿?与?????捅泶镂尴喙匦裕?玞.??雋????高表达具有 结果三者均表达升高。在陈伟等啦】的研究中表明增生瘢痕组织中???蛋白含 明显增高。?????取??恐な礹??在病理性瘢痕中表达增高。 制和肿瘤的基因治疗作较多的研究,据本人所查文献尚未见国内外学者在??玎 病,也是长期以来国内外学者研究的难点和重点。本研究组的前期研究表明,人 ??扌韪ㄖ?《荆?扇菽纱笤?.??庠碊?; 盒可达???。 ??研究目的 基因治疗方面作相关研究的报道。本研究组的预实验研究表明,人工合成的互补 望其能通过抑制与瘢痕疙瘩成纤维细胞中原癌基因?甿?结合位点结合,从而减 体缩短而不稳定,导致瘢痕疙瘩成纤维细胞的衰老和死亡,最后瘢痕疙瘩脱落或 ? ??研究内容 ??赴???诎?安《荆?⒂ü舛?縋?测病毒滴度。 ? 苏州净化设备厂 一?℃低温冰箱 美国???公司 匀浆器 江苏金坛市晶玻实验仪器厂 苏州设备厂 上海三中医疗器械有限公司 ??瓹型空气浴振荡器 格兰仕?????.?型微波炉 江苏海门麒麟医用仪器厂 ???甉—???超纯水器 ?????鷇 ??? ???????? ??? 普通琼脂糖 ??琔.?瓵 ??甎.?瓵 ? ? ???? ??? 琼脂糖胶同收试剂盒 ?? ?????? ?? ??甎.?瓵 菌种?????????妇? ??脂质体转染试剂盒 ????荆琔.?瓵 ??? ??? ??、??细胞 焦碳酸二乙酯??? 二甲基亚砜??? ? 溴化乙锭?? ???琔.?瓵 ????与???加??三蒸水

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