第九章植物体细胞无性系变异及种质资源保存精选.ppt

第九章 植物体细胞无性系变异及种质资源保存 二、变异主要涉及两个方面： 表型变异 包括形态特征、生长习性、抗性等 染色体变异 数目、结构 三、体细胞变异的优缺点： 优点： 适用于各种组培植物； 持续快速提供变异源； 消除优良品种的一个或几个缺陷； 提供新型变异株系。 缺点： 继代多次后，植株再生能力减弱； 变异不稳定，杂交或自交后发生变化； 变异没有可预见性，常产生不适变异。 四、体细胞无性系变异的诱导与离体筛选 步骤： （一）诱导起始材料的选择 （二）自发突变 （四）突变体选择 直接选择 其方法是用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出突变性。 贾敬芬等以小麦幼胚愈伤组织为材料，在含有1.4%NaCl的N6培养基上直接筛选出小麦耐盐系。 郑企成等曾将小麦“京花1号”花药经γ射线处理后，再经0.5NaCl培养基直接筛选出耐盐再生株系。 间接选择 间接选择是一种借助于与突变表现有关的性状作为选择指标的筛选方法。 Dorffling等以羟脯氨酸（HYP）为选择剂，获得了耐HYP的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且能稳定遗传。 林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬浮细胞经γ射线照射，然后在高浓度脯氨酸培养基中培养筛选，获得了抗寒体细胞变异愈伤组织，其再生植株抗寒性比供体植株提高2.4℃。 （五）突变体稳定性鉴定 一、供体植物—生理状态 以分生组织为外植体的再生植株通常可以维持供体植物的典型性，体细胞变异频率很低。 以分化组织为外植体的再生植株容易发生体细胞变异，其频率与分化程度有关。 一、供体植物—遗传背景 基因型：植物种基因型间变异频率差异较大。 倍性水平：多倍体和染色体数目较多的植物其变异频率比二倍体和单倍体高。 二、培养基—激素 培养基激素浓度和不同激素配比对再生植株的染色体倍性有一定的影响。 激素引起的变异大多为倍性增加。 少数情况下激素引起类减数分裂而使倍性减少。 二、培养基—物理状态 一般来讲，悬浮培养的细胞较半固体培养的细胞易产生变异。 三、培养类型 原生质体培养的体细胞变异大于细胞培养，而细胞培养的变异又大于组织器官培养的变异。在细胞培养中，性细胞培养再生植株的变异要大于体细胞培养的植株。 四、继代次数 由继代次数引起的体细胞变异普遍存在。一般来说，继代时间越长，继代次数越多，细胞变异的机率就越高。 －烟草继代培养５年的愈伤组织，其再生植株与供体基 因型相比，几乎没有形态正常的植株。染色体分析表 明其大多为非整倍体和多倍体。 －玉米从刚诱导的愈伤组织中分化的植株，在形态上与 供体基因型基本一致，但培养３年后愈伤组织的再生 能力显著下降，再生植株生长异常。细胞学分析显示 染色体断裂和带型变异。 一、改良作物品种、拓宽种质资源 据统计，诱导突变已被用来改良诸如小麦、水稻、大麦、棉花、花生和菜豆这些种子繁殖的重要作物。 在全世界50多个国家中已发放了1000多个由直接突变获得的或由这些突变相互杂交而衍生的品种。 在各国现有通过体细胞诱变选育的谷类作物品种中，品质得到不同程度改良的占34.3%。 在水稻方面，国外至少育成了12个米质优良的品种。如法国选育的Delta，以其良好的籽粒品质占该国水稻总面积的20%。 此外，还有丹麦无花青素原大麦Galant。 据不完全统计，诱变品种中大约有1/4是抗病品种，其中80%左右为抗真菌品种。 耐盐、抗旱、抗寒变异也已筛选出众多中间材料，有的已进入区域试验，有的已用于生产。 二、加强外源基因向栽培种的渐渗 对远缘杂交的体细胞杂种、单体异附加系和异代换系等材料进行组织培养，能使它们发生遗传交换，提高外源基因向栽培种渐渗。 三、遗传学研究 突变体直接用于基因功能鉴定 突变DNA序列用作分子标记进行遗传研究 利用突变体策略已分离出一些功能基因和抗病基因，如玉米乙醇脱氢酶基因ADH，赤霉素合成相关基因、生长素敏感性基因等。 四、发育生物学研究 利用体细胞突变策略对植物发育的基因调控研究已在模式植物拟南芥和金鱼草等植物中广泛开展，并分离出一大批不同发育阶段和组织类型的突变体。 以突变体为工具，还从组织学和细胞学角度分析鉴定了一些基因的表达与植物发育的关系。 在烟草、玉米中均通过质体突变体分离鉴定了与植物叶绿体发育有关的核基因。玉米黄化突变体pun是一个在光照下不可逆转的突变体，分析显示，该突变体为一核单基因隐性突变，该基因的突变扰乱了叶绿体基因编码的蛋白质积累，进而使叶绿体膜系统发育不足，类囊体相关蛋白不能积累。 五、代谢途径研究 突变体作为代谢活动调控研究的工具，具有十分便利和高效的优势。可根据需要建立某一代谢途径中每一个调节点的突变体，也可以与基因工程相结合，对一些关键