植物病理學实习报告.docVIP

《普通植物病理学》实习报告 11植物保护（微生物工程）1班 #### ￥￥￥￥￥￥￥￥￥￥ 实习目的 通过两周的课程教学实习，巩固和加深对课堂所学知识的理解，将所学的理论知识用于分析实践问题，学会灵活运用课程知识解决生产实践问题，使对知识的掌握上一个台阶。通过实际操作和训练，掌握课程实践教学大纲所规定的 专业基本操作和实践技能， 主要包括： 病害标本采集方法、病害调查方法、病害田间诊断方法、不同病原类型（真菌、细菌、病毒、线虫、寄生性种子植物和非侵染性病害）的田间识别和症状观察、培养基制备、病原真菌和细菌的分离培养、线虫的分离和形态观察、病原真菌的玻片标本制作技术、病害鉴定技术、植物病害过塑标本和镜框标本制作法等。 二、实习内容与方法 (一) 植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定 (二) 植物病原的分离与培养 （三）植物病原真菌玻片标本制作 （四）植物病害过塑标本的制作 (五) 线虫的分离 三、实验步骤 标本采集 1、外出实习地点 (1)华农大农场 (2)华农大增城宁西基地 (3)广州白云区蔬菜地 2、采集方式与标本采集要求 (1)直接从病害植株以手、刀、剪刀提取病样。 (2)症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。 (3)真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。 (4)每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。 (5)采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。 (6)寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。 (7)适于干制的标本，应随采随压于标本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。 (8)柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。 (10)黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。 (11)每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。 标本制作 （1）把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，整形后分层压在标本夹中，放一层标本纸（每层3-4张）放一层标本，并写上标签（标签内容为病害名称地点、采集人姓名采集日期实验准备(一)清洁环境：分离工作严格说应在无菌条下进行，无菌室或无菌箱是分离不可缺少的设施。若限于条件实验只能在普通房间进行时，必须对房间进行彻底扫除，清洁环境、搞好卫生。地上多洒些水，以消除室内尘埃，分离开始前准备好一切用品，避免工作过程中频繁走动，以破坏环境带来杂菌，工作台上铺好湿毛巾，点燃酒精灯。(二)实验材料及用品准备　 1病组织材料 水稻纹枯病病叶 水稻白叶枯病病叶　 2用品准备　　0.1%升汞溶液(广口瓶盛装)；　　95%酒精(广口瓶盛装)；　　1000ppm链霉素；　　瓶装牛肉膏蛋白胨培养基；　　瓶装马铃薯琼脂培养基；此外，还有以下备品，无菌水1瓶，灭菌培养皿6付，灭菌1毫升吸管2支，解剖剪、 解剖刀和镊子各1把，移植环，移植钩、酒精灯、珐琅盘和试管架各1个，毛巾1条，玻璃铅笔1支及火柴等。　取玉米斑病病稀释分离法 1消毒：将剪下的植物组织用清水洗干净，然后用75%的酒精浸泡30秒，在用0.1%的升汞洗0.5~1分钟，最后用无菌水洗涤3次。 2捣碎：取用一个灭菌小皿，向内滴加1~2滴无菌水，然后灭菌剪刀剪碎已洗涤好的组织，放入水中静置5-10分钟，制备成菌悬液。 3划线：用接种环取一环菌悬液进行平板划线。 4培养：将平板倒置，写标签，至于28-30摄氏度培养，2天后，观察分离结果。 植物病原真菌玻片标本制作 1.内容、材料和方法 实验材料：苦瓜霜霉病病叶、竹子黑痣病病叶 实验器材：解剖针、剪刀、载玻片、盖玻片、无菌水、立体显微镜 2.实验步骤 （一）苦瓜霜霉病病原装片制作 1取苦瓜霜霉病病叶，用剃刀或解剖针 轻轻刮取苦瓜霜霉病病叶上的白色粉状物。 2在载玻片上点一滴绵蓝乳酚油，将针尖或刀片浸于绵蓝乳酚油中，使锈粉进入漂散于绵蓝乳酚油滴中。重复以上操作，待获得足够锈粉后，盖上盖玻片。贴上标签。 3显微镜下观察。 （二）竹子黑痣病病原装片制作。 1 取竹子黑痣病病叶，选