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专题一 基因工程 一、基因工程的概念 基因工程是指：按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以 新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上 进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。 二、基因操作的工具 1．“分子手术刀”—— （1）来源： （2）功能： （3）种类：约 4000 种， 举例：EcoRI 限制酶：识别 个核苷酸，在 之间切割。 SmaI 限制酶：识别 6 个核苷酸，在 之间切割。 （4）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：在中轴线两侧切开时产生的是 ；在中轴线处切开时产生的是 。 练习 1：在下列 DNA 片段图上表示出 EcoRI 限制酶的切割位点: 练习 2：写出下列黏性末端的另一个片段： 2．“分子缝合针”—— （1）功能：缝合 （2）与 DNA 聚合酶作用的异同： 相同点： 不同点：DNA 聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成 键。 DNA 连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。DNA 聚合酶是以为 模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链 上的两个缺口同时连接起来(不能连接单链DNA)，因此DNA连接酶不需要模板。 （3）分类：（两类） EcoliDNA连接酶：来自 ，连接双链 DNA 片段 ，不能连接双链 DNA的 ； T4DNA 连接酶：来自 ，能连接 DNA 片段 和 ；但是连接的 效率较低。 3．“分子运输车”—— （1）运载体具备的条件： ① ② ③ （2）最常用的运载体： ,它是一种裸露的、结构简单的、位于细菌 之中的具有 的双链 分子。 （3）其它载体： 基因操作的工具针对性训练 1．基因工程的设计施工是在什么水平上进行的 A．细胞 B．细胞器 C．原子 D．分子 2．下列关于限制酶的说法不正确的是 A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化来的 B．不同的限制酶识别不同的核苷酸序列 C．限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性 D．限制酶的作用只是用来提取目的基因 3．下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是 A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性内切酶的活性受温度影响 C．限制性内切酶能识别和切割 RNA D．限制性内切酶可从原核生物中提取 4．下列关于 DNA 连接酶作用的叙述正确的是 A．将单个核苷酸加到某 DNA 片断末端，形成磷酸二酯键 B．将断开的两个 DNA 片断的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键 C．连接 DNA 两条链上碱基之间的氢键 D．只能将双链 DNA 片断互补的黏性末端连接起来，而不能将双链片断的平末端进行连接 5．一种限制酶切割 DNA 时，切出的 DNA 末端是 A．只有平末端 B．只有黏性末端 C．既有黏性末端，又有平末端 D．只有黏性末端或只有平末端 6．关于 DNA 重组技术中基本工具的叙述正确的是 A．限制酶的作用部位是特定两个核苷酸之间的氢键 B．目的基因经限制酶切割后一定会形成黏性末端 C．DNA 连接酶是在两个 DNA 片段之间形成磷酸二酯键 D．质粒 DNA 分子上一定含有抗四环素基因 7．不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A．能复制 B.有多个限制酶切点 C．具有标记基因