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第17章 支原体 医学技术学院 杜纪英 支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性,可以通过一般的除菌滤器,是目前所知能独立生活,自行繁殖的最小原核细胞型微生物。由于它们能形成有分支的长丝,故称之为支原体。 概 念 支原体在自然界中广泛分布,因其缺乏细胞壁归属于柔膜体纲的支原体目支原体科。 支原体科又分四个属:支原体属、血虫体属、血巴尔通氏体属和脲原体属。 对人致病的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖器支原体、穿通支原体和溶脲脲原体。 第一节 分 类 第二节 肺炎支原体 一、临床意义 肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae, MP),是引起呼吸道感染的一种病原体,所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主,又称之为原发性非典型性肺炎。 过去认为肺炎支原体是温和的病原体,现也可引起严重的双侧肺炎和其他系统的肺外并发症。 第二节 肺炎支原体 一、临床意义 肺炎支原体感染呈全球性分布,以温带为主。散在发病,3~5年出现一次地区性流行。 主要经飞沫传染。流行特点为间歇性,长时期缓慢播散,可持续数月至一年。 患者以儿童和青年人居多,冬秋季较多见。 二、微生物学检验 (一)基本特性 1.形态与结构 短细丝状,长约2~5μm,在近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构;典型的肺炎支原体形态类似酒瓶状,无细胞壁,仅有细胞膜,电镜下其细胞膜由三层结构所组成。 革兰染色阴性,Giemsa染色淡紫色。 2.抗原结构 糖脂抗原:抗原性强,特异性差; 蛋白质抗原:P1膜蛋白是支原体的主要型特异性抗原。 3.培养特性 营养要求高,培养基中必须添加10%~20%的人或动物血清,初次分离培养支原体,尚须添加10%的酵母浸膏,并置于5%CO2 的条件下生长较好。 生长最适pH为7.8~8.0,pH7.0以下可致其死亡,最适温度为36~37℃。 液体培养基中时有极浅淡的混浊; 固体培养基上形成直径10~100μm的菌落。初次分离时菌落呈细小的草莓状,反复传代后呈典型的“油煎蛋”样菌落; 半固体培养基中呈现肉眼可见的细小粒状菌落。 (一)基本特性 (一)基本特性 肺炎支原体“油煎蛋”菌落 (10×) 5.抵抗力 对热的抵抗力与细菌相似。 耐冷,-70℃或液氮可长期冻存。 如在4℃放置不要超过3d,56℃很快灭活。 对干燥敏感。 对青霉素、头孢菌素等作用于细胞壁的抗菌药物不敏感。 对作用于其核蛋白体,抑制或影响菌体蛋白合成的抗菌药物敏感,如红霉素、强力霉素、螺旋霉素等。 (一)基本特性 (二)肺炎支原体的检验程序 1.标本采集 患者痰、咽拭子、鼻咽洗液、支气管分泌物、血清标本等 2.标本直接检查:1)标本涂片 2)核酸检测 PCR法:快速、敏感和特异 3.分离与鉴定 分离培养:培养基是以牛心消化液为基础另加20%小牛血清及新鲜酵母浸液制成的液体或固体培养基。加入适当浓度醋酸铊、青霉素。 初次分离生长缓慢,先将标本接种于加有葡萄糖以及酚红、美蓝指示剂的液体培养基中增菌,1周后培养基由紫变绿,液体清晰,此时,可转种于固体培养基上。 鉴定:典型“油煎蛋”样菌落,能发酵葡萄糖产酸,不能利用精氨酸与尿素,可还原美蓝,能使无色的TTC还原为粉红色的甲臢。 4.抗体检测 方法有酶联免疫吸附测定、冷凝集试验、补体结合试验、间接血凝试验等。 4.生化反应 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性 肺炎支原体 + - - 红细胞 肺炎、支气管炎 泌尿生殖道感染 人型支原体 - + - - 生殖器支原体 + - - - 穿通支原体 + + - 红细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞 条件感染、 多见于艾滋病 溶脲脲原体 - - + - 泌尿生殖道感染 人类主要支原体生物学性状 (一)基本特性 (二)肺炎支原体的检验程序 阳性 阴性 (二)肺炎支原体的检验程序 肺炎支原体固体培养 第三节 溶脲脲原体 溶脲脲原体 (Ureaplasma urealyticum, Uu)也称解脲脲原体,是1954年Shepard首先从非淋球菌尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得,因其菌落细小,故曾称为T支原体。按其分解尿素的特性命名为溶脲脲原体。在分类学上属人支原体科脲原体属。 第三节 溶脲脲原体 一、临床意义 Uu寄居于人泌尿生殖道,主要传播途径为性接触传播和母婴传播。Uu所引起的疾病最常见的是非淋菌性尿道炎(NGU),Uu多寄生在男性尿道、阴茎包皮和女性阴道。若上行感染,可引起男性前列腺炎或附睾炎;女性阴道炎、宫颈炎,并可导致流产。也能引起早产儿及低体重新生儿呼吸道和中枢神经系统感染。 二、微生物检验 (一)基本特性 1.形态结构 以球形为主,直径约50~300nm,单个或呈双排列,能通过0.45μm微孔滤
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