【2017年整理】实验二 葡萄糖的一般杂质检查.docVIP

PAGE 实验二 葡萄糖的一般杂质检查 一、目的要求 1．掌握一般杂质检查的原理、操作方法及限量计算方法。 2．熟悉药物中一般杂质检查的目的和意义。 3.掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属限量检查的基本原理和方法。 二、基本原理 葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓缩结晶制得。 1．国内生产方法有以下几种： ⑴酸水解法：以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。 ⑵双酶水解法：以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。 ⑶酸酶水解法：以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。 根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、重金属、砷盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。 2．各种杂质检查原理如下： ⑴氯化物检查法 氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限量。 C1- + Ag+—→ AgCl↓ ⑵硫酸盐检查法 药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。 SO4 2- 十Ba2+ —→ BaS04↓ ⑶铁盐检查法 三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。 Fe3++6SCN- —→ [Fe(SCN)6]3- 红色 进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸3滴，煮沸5min，使Fe2+氧化为Fe3+。由于硝酸中可能含有亚硝酸，亚硝酸也能与硫氰酸根离子反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，以消除氧化氮生产的亚硝酸干扰。 ⑷重金属检查法 重金属是指在实验条件下，能与S2-作用生成硫化物而显色的金属杂质，如，银、铅、汞、铜、镉、铋、砷、锑、锡、锌、钻、镍等。在药品生产过程中遇到铅的机会较多，且铅在体内易积蓄中毒，故检查时以铅为代表。硫代乙酰胺(thioacetamide)在弱酸性(pH约3.5)溶液中水解，产生硫化氢，可与重金属离子结合生成有色硫化物的均匀沉淀，可与对照标准液同法处理比较。本方法的适宜目视比色范围为27mL溶液中含铅10～20?g，相当于标准铅溶液1～2mL，检查中根据规定含重金属的限量确定供试品的取用量。 CH3CSNH2+H2O —→CH3CONH2+H2S Pb2++H2S —→PbS↓+ 2H+ ⑸砷盐检查法 《中国药典》主要采用古蔡氏(Gutzeit)法检查砷盐。其原理是利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中的微量砷盐作用生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞(或氯化汞)试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，可判定药物中含砷盐的限量。其反应如下： AsO3 3- + 3Zn + 9H+—→AsH3 ↑  + 3Zn2+ + 3H2O AsH3 + 2HgBr2—→2HBr + AsH(HgBr)2(黄色) AsH3 + 3 HgBr2—→3HBr + As(HgBr)3(棕色) 五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为砷化氢，但生成砷化氢的速度较三价砷慢，故在反应液中加入碘化钾及酸性氯化亚锡将五价砷还原为三价砷，碘化钾被氧化生成的碘又可被氯化亚锡还原为碘离子。 AsO43- + 2I-+ 2H+—→AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2++ 2H+—→AsO33- + Sn4++ H2O I2 + Sn2+—→2I- + Sn4+ 溶液中的碘离子，与反应中产生的锌离子能形成配合物，使生成砷化氢的反应不断进行。 4I- + Zn2+ —→ [ZnI4]2- 氯化亚锡与碘化钾存在，可抑制锑化氢的生成，因锑化氢也能与溴化汞试纸作用生成锑斑，在实验条件下l00?g锑存在不会干扰测定。氯化亚锡又可与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起去极化作用，从而使氢气均匀而连续地发生。 ⑹干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，根据所减失的重量和取样量计算供试品干燥失重的百分率。干燥失重检查法主要控制药物中的水分，也包括其他挥发性物质如乙醇等。 ⑺炽灼残渣检查法 炽灼残渣系指有机药物经加热炭化后再被硫酸破坏，于高温(700℃～800℃)炽灼，有机物质被破坏分解为挥发性物质逸出，残留的非挥发性无机杂质(多为金属的氧化物或盐类)成为硫酸盐，称为炽灼残渣。如炽灼残渣需留作重金属检查，则控制炽灼温度在500℃～600℃。 三、仪器与试剂 电热恒温干燥箱，普通电炉，水浴锅，50mL比色管，量筒，50mL烧杯；葡萄糖，硝酸银，氯化钠，盐酸，硫酸钾，氯化钡，硫氰酸