放射肿瘤学工基础.ppt

第十章放射肿瘤学基础 第一节： 肿瘤模型体系 常见的肿瘤模型包括： 1、移植性实体瘤动物模型 2、人类肿瘤异种移植模型 3、多细胞球状体体外肿瘤模型 一、移植性实体瘤动物模型 肿瘤的传代方式：从一代动物移植到下一代。 实验动物：兄妹交配近亲繁殖。 方法：无菌分离肿瘤细胞，给同系受体动物每只皮下接种1×104～106个肿瘤细胞，数天或数周接种部位出现可触及的肿瘤。 特点： 重复性、稳定性、定量性好 因常用小鼠故对人体缺乏反应性 实体瘤的评价参数： 1、肿瘤生长速率：通过测量肿瘤大小（平均直径或体积）表示肿瘤生长速率的快慢。样本量要大。 实验中每天或每两天（由肿瘤生长速率而定）测量肿瘤大小，所得结果用时间（横坐标）与肿瘤大小（纵坐标）绘制肿瘤曲线。当肿瘤长到一定大小时（大鼠：8～10mm；小鼠2～4mm）则可进行多种方案处理，观察处理后肿瘤生长速率的变化。 一是从照射时算起，肿瘤再长到与照射当时同等大小所需的时间； 一是从照射时算起，肿瘤长到指定大小所需的时间（TX射线），与对照组肿瘤长到同等大小所需时间（T肿瘤）相比较。 2、 TCD50 TCD50即50%肿瘤控制剂量（50% tumor control dose） 评价某种放射治疗方案对肿瘤的抑制程度； 测定方法：将有同等大小肿瘤的荷瘤动物分组→不同剂量局部照射肿瘤→定期观察→分析（以肿瘤局部控制率为纵坐标，照射剂量为横坐标制图） → TCD50。 3、稀释测定技术 方法：荷瘤动物→照射→取瘤→制细胞悬液→计数→倍比浓度稀释→接种→观察肿瘤出现情况→计算50%动物发生肿瘤的肿瘤数（TD50） 将受0剂量照射的荷瘤动物的TD50与受不同剂量照射的荷瘤动物的TD50值相比，分别计算出各剂量的存活分数。 4、肺集落测定 方法：荷瘤动物原位照射肿瘤后→取瘤制成单细胞悬液→将已知数量的单细胞悬液注入受体动物→3周后处死动物→计数肺集落形成数。 将受不同剂量原位照射的肿瘤细胞注入受体动物后所形成的肺集落数与0剂量照射形成的肺集落数相比，可求出各照射剂量下的存活分数，并绘制出肿瘤细胞经体内照射后的剂量存活曲线。 5、体内－体外测定技术 采用体外集落形成方法，测定体内照射后肿瘤细胞存活率的方法。 方法：将受不同剂量体内局部照射的肿瘤取出，分别制备单细胞悬液，将一定数量的细胞种入培养皿中，在离体条件下培养10～14天后，存活细胞可形成集落，计数集落，计算出存活的肿瘤细胞数，与0剂量下存活的肿瘤细胞数相比，得出某剂量下细胞的存活分数 。 二、人类肿瘤异种移植模型 多种人类肿瘤细胞可以在免疫缺陷的动物中以异种移植生长。通常用于异种移植的受体动物为裸鼠 优点：保留人类的核型及各自的反应特性。 缺点： ①排斥反应； ② 移植肿瘤细胞在小鼠体内发生动力学和细胞选择，出现乏氧细胞； ③移植肿瘤在小鼠体内维持人类肿瘤的组织学特性，而基质组织则来源于小鼠。在对人类肿瘤细胞异种移植物的研究中，血管系统的供应起十分重要的作用，因此，所得结果的确切性则较鼠类肿瘤的研究差。 三、体外肿瘤模型系统－多细胞球状体 某些肿瘤细胞在培养中形成多细胞球状体，即每通过一次细胞分裂，子细胞粘在一起形成球形细胞团，随培养时间增加，细胞团逐渐增大，有时可成为由数百万细胞组成的一个大细胞团。 特点： 有一定组织学特性与体内肿瘤生长相似 中心为非周期性类G1期细胞－乏氧性细胞 更好的模拟了体内实体瘤，有利于增敏剂和化疗药物的研究。 缺点： 必须是悬浮生长细胞，成团生长，不分离 细胞群的组成 1）非同步的周期细胞 2）非周期性的类G1期细胞 3）非周期性的类G1期乏氧细胞 第二节 低氧及再氧合 一、乏氧细胞 氧含量非常低的细胞，对辐射不敏感 肿瘤由两部分细胞组成。一部分是含氧细胞，对辐射敏感 ；另一部分是乏氧细胞(10~20%)，对辐射不敏感 二、组织氧合 改变组织氧合状况，提高临床上对肿瘤放射治疗的治愈率 1、高压氧舱 2、照射同时，于常压下吸入含有95％氧气与5％二氧化碳的混合气体 3、照射前给病人吸入10％氧气的方法 4、采用传递修饰剂（如氟碳乳剂），由于它携带大量的氧，能进入组织的乏氧区后放出氧 三、乏氧细胞再氧合 分次照射后乏氧细胞变成为氧合细胞的现象 乏氧细胞再氧合是临床肿瘤放射治疗中，小剂量分次照射方案制定的重要细胞学基础。 第三节 肿瘤细胞动力学 研究肿瘤细胞群的增殖动力学，是观察细胞的运动，以形容一个细胞群的生长来说明肿瘤细胞总数的变化，而不是个体细胞的循环； 由于正常细胞群和肿瘤细胞群增殖动力学的差异，射线对它们产生不同的影响和损伤，通过改变影响因素，扩大损伤差异，为提高肿瘤治疗疗效提供细胞