刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩的影响__培训课件.pptVIP

刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩的影响  掌握：蛙类动物坐骨神经—腓肠肌标本和神经干标本的制备方法，电刺激强度或电刺激频率改变对骨骼肌收缩形式的影响及机制。 熟悉：刺激强度与复合动作电位幅值的关系。 了解：测定神经干动作电位的传导速度和不应期的测定方法。 实验目的 刺激：细胞所处环境因素的变化。生理学中常用电刺激。 阈刺激：相当于阈强度的刺激。阈强度是指能使组织发生兴奋的最小刺激强度。 最大刺激：具有引起肌肉最大收缩的最小刺激强度的刺激。 实验原理 1.静息电位 静息电位是指细胞未受刺激时，存在于细胞膜内外两侧的电位差。静息电位（Resting potiential, RP）。 2.动作电位 电刺激神经，引起神经纤维膜产生去极化，当去极化达阈电位水平时，膜产生一次在神经纤维上可传导的快速电位变化-------动作电位（action potiential, AP）。 中枢神经系统 神经冲动（AP) 肌细胞兴奋收缩 ? AP跨细胞传导 爆发肌细胞膜AP AP传到末梢 Ca2＋内流 与N型受体结合 终板膜对Na＋、K＋ 通透性↑ 囊泡移动、融合、破裂， 释放ACh 终板膜去极化 终板电位(EPP) 去极化达TP 神经-肌接头处的兴奋传递过程 4、骨骼肌收缩的形式 （一）单收缩(single twitch) 肌肉受到一次刺激，引起一次收缩和舒张的过程。 实验原理 刺激强度与肌肉收缩的关系 2.不完全强直收缩 肌肉受到连续刺激，前一次收缩和舒张尚未结束，新的收缩在此基础上出现的过程。 （二）强直收缩(tetanus) 1.完全强直收缩 刺激频率与肌肉收缩的关系 实验原理 实验材料 实验动物：牛蛙。 实验器材：常用蛙类手术器械，张力换能器，BL-420生物机能实验系统，电极，铁支架，培养皿，滴管。 药品与试剂：任氏液。 1、制备在体坐骨神经-腓肠肌标本 破坏脑和脊髓，一侧下肢剥皮 分离一侧腓肠肌，结扎肌腱 分离同侧大腿部坐骨神经 实验步骤 1）破坏脑和脊髓 左手握蟾蜍，食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯； 右手持金属探针由头前端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。 探针由枕骨大孔处垂直刺入，再转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针捣毁脑组织。 退出探针，再由枕骨大孔刺入，转向尾方，与脊髓平行刺入脊管破坏脊髓。 脑和脊髓是否完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。 破坏脑和脊髓 游离坐骨神经—腓肠肌： 大头针将标本绷直、固定，背面向上； 股二头肌与半膜肌肌缝内，用玻璃分针分离坐骨神经，直到腘窝； 沿腓肠肌向下找到跟腱，并穿线结扎，结扎线远端剪断跟腱，执线提起腓肠肌，剪去下方相连筋膜，注意勿损伤腓肠肌，保留腓肠肌起始点与骨的联系。 结扎跟腱的丝线与张力换能器连接，坐骨神经搭在刺激电极上，开始实验。 2、连接实验装置 张力换能器一端与腓肠肌肌腱上的结扎线连接，另一端与BL－420/410系统相连。 坐骨神经放在刺激导线的神经钩上。 ①进入BL-410/420系统→“实验项目”→神经肌肉实验→刺激强度与反应的关系→系统自动记录。 调节起始强度，确定阈刺激，分析刺激强度与骨骼肌收缩的关系。 ②进入BL-410/420系统→“实验项目”→肌肉神经实验→刺激频率与反应的关系→经典实验→系统自动记录。 观察单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。 3、软件操作 标本制备过程中切勿过度牵拉神经干和肌肉 实验中每次肌收缩后必须间隔一定时间0.5－1min再给刺激，以确保肌肉的收缩力和兴奋性。 经常用任氏液湿润标本，使之维持良好机能状态。 注意事项 频率选择由低开始逐渐增大，每种频率的刺激持续时间不宜太长，出现理想的收缩曲线即可。 若肌肉在未给刺激时即出现挛缩，可能是仪器漏电所致，应检查接地是否良好。 注意事项