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生化培训[精选]
临 床 化 学 一、肝功能项目检测 二、肾功能项目检测 三、血脂项目检测 四、糖类项目检测 五、影响生化结果的因素 一、肝功能检测 1.1血清总蛋白测定 1.2血清白蛋白测定 1.3血清ALT测定 1.4血清AST测定 1.5血清GGT测定 1.6血清Tbil测定 1.7血清Dbil测定 1.8血清ALP测定 1.1 血清总蛋白测定 双缩脲常规法(全自动生化仪) 原理:所有蛋白质分子都含有肽链。在碱性溶液中,肽链与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物。蓝紫色化合物在540nm的吸光度与肽链的数量呈正比关系,可以基计算蛋白质含量。这一反应称双缩脲反应,这种试剂称双缩脲试剂。 双缩脲比吸光度法 原理:按照Doumas方法所规定的配方配置双缩脲试剂、控制反应条件和校准分光光度计的情况下,双缩脲反应的呈色强度时稳定的,可以根据蛋白质双缩脲复合物的比吸光度,直接计算血清总蛋白质浓度。 计算公式: 血清总蛋白(g/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×蛋白标准液浓度 参考区间: 健康成人走动后,血清总蛋白浓度为64~83 g/L 健康成人静卧时,血清总蛋白浓度为60~78 g/L 临床意义 血清总蛋白浓度升高: ①血清中水分减少,使总蛋白浓度相对增高。凡体内水分的排除大于水分的摄入时,均可引起血浆浓缩,尤其是急性失水时(入呕吐、腹泻、高热等)变化更为显著,血清总蛋白浓度有时可达100~150g/L。又如休克时,由于毛细血管通透性的变化,血浆也可发生浓缩。慢性肾上腺皮质功能减退患者,由于钠的丢失而致继发性水分丢失,血浆也可出现浓缩现象。 ②血清蛋白质合成增加。大多发生在多发性骨髓瘤患者,此时主要是球蛋白的增加,其量可超过50g/L,总蛋白则可超过100g/L。 血清总蛋白浓度降低: ①血浆中水分增加,血浆被稀释。如因各种原因引起的水钠潴留。 ②营养不良和消耗增加。长期食物中蛋白含量不足或慢性肠道疾病所引起的吸收 不良,使体内缺乏合成蛋白质的原料,或因长期患者消耗性疾病,如严重结核病、甲状腺功能亢进和恶性肿瘤等,均可造成血清总蛋白浓度降低。 ③合成障碍,主要是肝功能障碍。肝脏功能严重损害时,蛋白质的合成减少,以白蛋白的下降最为显著。 ④蛋白质丢失。严重烫伤时,大量血浆渗出,或大出血时,大量血液的丢失;肾病综合征时,尿液中长期丢失蛋白质;溃疡性结肠炎可从粪便中长期丢失一定量的蛋白质,这些均可使血清总蛋白浓度降低。 1.2 血清白蛋白测定 方法:溴甲酚绿法,溴甲酚紫法 原理:在PH4.2的缓冲液中,白蛋白分子带正电荷,与带负电荷的溴甲酚 绿(BCG)生成蓝绿色复合物,在波长628nm处有吸收峰。复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准物质比较,可求得血清中白蛋白的浓度。 计算:血清白蛋白(g/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×白蛋白标准液的浓度(g/L) 目前,生化自动分析仪同时测定血清总蛋白(双缩脲法)和白蛋白(BCG 法),并自动计算出球蛋白浓度和白/球蛋白比值。 参考区间:4~14岁儿童,血清白蛋白浓度为38~54g/L 健康成人血清白蛋白浓度为34~48g/L 临床意义: 血清白蛋白在肝脏合成,血清白蛋白浓度增高常由于严重失水、血浆浓缩所致,并非蛋白质绝对量的增加。临床上,尚未发现单纯白蛋白浓度增加的疾病。 白蛋白浓度降低的原因与总蛋白浓度降低的原因相同。但有时总蛋白的浓度降低,同时伴有球蛋白浓度的增高。 急性白蛋白浓度降低,主要由于急性大量出血或严重烫伤时的血浆大量丢失。 慢性白蛋白浓度降低主要由于肝脏合成白蛋白功能障碍。腹水形成时白蛋白的丢失和肾病是白蛋白从尿液中的丢失。严重时,白蛋白浓度可低于10g/L。白蛋白浓度低于20g/L时,由于胶性渗透压的下降,常可见到水肿等现象。 妊娠时,尤其是妊娠晚期,由于体内对蛋白质的需要量增加,同时又伴有血浆容量增高,血清白蛋白可明显下降,但分娩后可迅速恢复正常。 极少数先天性白蛋白缺乏症患者,由于白蛋白合成障碍,血清中几乎没有白蛋白,但患者不出现水肿。 球蛋白浓度增高 临床上常以γ-球蛋白增高为主。球蛋白增高的原因,除水分丢失的间接原因外,主要有下列因素: ①感染性疾病,如结核病、疟疾、黑热病、血吸虫病、麻风病等; ②自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热类风湿性关节炎、肝硬化等; ③多发性骨髓瘤,此时γ-球蛋白可增至20~50g/L 球蛋白浓度降低 球蛋白浓度降低主要是合成减少。 正常婴儿出生后至3岁内,由于肝脏和免疫系统尚未发育
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