蛋白质概论全解.ppt

* （2）与甲醛的反应 前面已讲过，氨基酸的氨基可以与甲醛反应生成羟甲基衍生物，使氨基的碱性变得很弱（被掩蔽了），从而使羧基达到最大酸性，从而可以用来测定aa的含量。 （3）酰化反应，（也就是在氨基上面再连上一个羰基，键就叫做酰胺键）把氨基酸的氨基和另外一个分子的羧基发生的反应叫酰基化反应。 氨基酸的α-氨基很容易与各种酰化剂发生酰化反应，比如酰氯，酸酐的反应活性比普通的羧酸高，生成氨基的酰基化产物。 如苄氧甲酰氯的反应。 P29 这个反应常常在一级结构分析和人工合成多肽时得到应用，如dansyl-Cl，可以用来测定蛋白质的N-末端aa. 经过酰化以后，氨基酸的氨基的活性大大下降，所以在人工合成多肽时，起到保护氨基的作用。 应当会写几种酰氯：①苄氧酰氯，②叔丁氧羰酰氯。③dansly-Cl P29 ④乙酰氯，⑤苯二甲酸酐。 如苄氧甲酰氯的反应。 * * 2、酰化反应 苄氧甲酰氯（carbobenzyloxychloride,Cbz-cl) 叔丁氧甲酰氯 对-甲苯磺酰氯 邻苯二甲酸酐 多肽的人工合成中被用作氨基保护剂。 ★丹磺酰氯（DNS-cl，5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯）常用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。 N Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C→→ DNS—Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C 水解 DNS—Gly、 Ala、 Ser、 Leu、 Phe DNS-AA 在紫外光激发后发黄色荧光。 常用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定 * * （4）烷化反应 氨基酸中α-NH2中的氢可以被烷基基团取代。常用的反应试剂是卤代烃，因为常用的烃反应活性比较低，如果在烃基上连上一个卤素，反应活性就比较高。常见的反应有与2，4-二硝基氟苯的反应( DNFB，FDNB）此试剂也叫sanger试剂。P29 ★Sanger 反应? 2.4一二硝基氟苯（DNFB） DNP-氨基酸(二硝基苯基氨基酸），黄色，层析法鉴定，被Sanger用来测定多肽的NH2末端氨基酸 * 第二个重要的反应是与苯异硫氰酸酯的反应。P30 这一反应首先由Edman使用的。 这两个反应均可用于蛋白质的末端aa的测定，在蛋白质的氨基酸序列分析中占有重要地位，按照Edman反应，制成了aa序列分析仪。此方法即可降解多肽链，又可以鉴定末端aa，形成的这个环式衍生物从多肽链上脱下来，不损伤剩余的多肽链。 下一部分学到蛋白质的序列测定会再次用到这三个反应，所以需要掌握这三个反应的特点。 * * （5）与醛类（特别是芳香醛）的反应 氨基酸的α-氨基能与醛类反应生成弱碱，这个弱碱叫西佛碱（schiff’s base).下册讲到氨基酸转氨基会生成这样一个中间产物。 如苯甲醛的反应： 这个反应与甲醛的反应是不一样的。 西佛碱是某些酶促反应的中间产物（如转氨基反应的中间产物）。 * 3、由α-羧基参加的反应 α-氨基酸的α-羧基具有一般羧酸的羧基的性质。 可与碱成盐，可与醇成酯，和成酰胺反应，脱羧反应等，还原成醇的反应等。 （1）氨基酸羧基的成酯反应（成盐反应） ①常用来保护aa的羧基，从而使氨基得到突出，或者说使氨基活化了，氨基易与酰基起反应。 （这就是说羧基被保护后，氨基被活化，而氨基则此时易于酰化。） ②另一类酯化可以使它的羧基被活化，即增加了它作为酰化剂的能力。这种酯叫“活化酯”，如： P31 * （2）酰氯化反应 氨基酰化氨基酸，可以在低温下与PCl5或PCl3起反应，形成酰氯，从而使它的羧基被活化。在肽的人工合成中有应用，使羧基的反应活性增加。 （3）成酰胺反应 氨基酸的酯类可以与氨类起反应，生成酰胺，这是体内贮存氨类的一种反应。 P31 (4)脱羧作用 在生物体内氨基酸在脱羧酶的作用下放出二氧化碳并生成相应的一级胺。 叠氮反应也可以用于羧基的活化，也常用于肽的人工合成。 P32 以上的反应不一定记住反应过程，但要记住它的用途。 --------------- ②成酰氯的反应 P138 氨基被保护后，羧基可与二氯亚砜或五氯化磷反应，生成酰氯， 使羧基活化，在多肽的人工合成中常用。 * 4、氨基酸的侧链基团的反应 很多氨基酸在侧链上都含有一些特征基团，可以进行一些特定的反应，主要是一些显色反应，因此常用来鉴定特定的aa，有特征反应的基团有： (1)苯环（Phe,Tyr) (2)酚基（Tyr) (3)-OH基（Thr, Ser, Hpr)，由于生成磷酸酯，或连接糖，主要在生物功能上起作用。 (4)-SH基或-S-S-键（Cys,Cyss)，二硫链在生物功能有作用 (5)吲哚基（Try) (6)咪唑基（His) （1）米伦式