复方烟酸缓释片质量研究.docVIP

复方烟酸缓释片 质量研究工作的试验资料及文献资料 1 性状 2 鉴别 2．1 烟酸的鉴别 参考中国药典2000年版二部烟酸鉴别项下方法，采用化学法作为本品的鉴别方法。 （1）取本品的细粉适量（约相当于烟酸0.25g），置100ml的量瓶中，加甲醇70ml，超声，加入水20ml，超声溶解，再加甲醇至刻度。滤过，取滤液20ml，滴加0.4%氢氧化钠溶液至遇石蕊试纸显中性反应，加硫酸铜试液3ml，即缓缓析出淡蓝色沉淀。三批样品均呈正反应。另取仅不含烟酸的处方量的细粉同法实验，结果显阴性反应。 （2）取本品片剂细粉适量（约相当于烟酸4mg），加2，4—二硝基氯苯8mg，研匀，置试管中缓缓加热熔化后，再加热数秒钟，放冷，加乙醇制氢氧化钾试液3ml，即显红紫色。三批样品均呈正反应。另取仅不含烟酸的处方量的细粉同法实验，结果显阴性反应。 2．2 洛伐他汀的鉴别 洛伐他汀含量测定项下的供试品溶液的色谱图中，有与洛伐他汀对照品溶液主成分峰保留时间一致的色谱峰。三批样品的供试品溶液与洛伐他汀对照品溶液的高效液相色谱图见附图1~附图4。 3 检查 3．1 有关物质 本品的主要成分为烟酸与洛伐他汀，由于烟酸较稳定，中国药典2000年版二部收载的烟酸原料及烟酸的制剂均无有关物质检查项，洛伐他汀则较不稳定，在美国药典24版及中国卫生部部标准（WS-045（C-033）-97）中均对洛伐他汀原料的有关物质进行检查。所以重点对本品中洛伐他汀的有关物质进行检查。 3．1．1 仪器及色谱条件 仪器：岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪 色谱柱：迪马ODS-C18，5μ,4.6×150mm 流动相：乙腈—甲醇—磷酸盐缓冲溶液（取磷酸二氢钠3.45g，加水900ml溶解，用10%磷酸调节pH4.0，加水稀释到1000ml，混匀）1.0ml/min 柱温：30℃ 检测波长：238nm 理论塔板数按洛伐他汀峰计算应不低于2000。 3．1．2 流动相的选择 参照美国药典24版中洛伐他汀片含量测定下的液相条件进行检查。在此条件下，烟酸的保留时间为1.5分左右，与溶剂峰重叠；洛伐他汀的保留时间为9.5分左右，理论塔板数达10000左右。 3．1．3 波长的选择 从洛伐他汀对照品在流动相的紫外光谱图（附图5）可看出，洛伐他汀在230nm、238nm、246nm有三个吸收峰，238nm处吸收最大，故选用238nm为检测波长。 3．1．4 供试品溶液的制备和测定 供试品溶液的制备：取本品1片，置研钵中研细，转移置100ml量瓶中，用80ml甲醇分次洗涤研钵，洗液并入量瓶中，超声10分钟，加20ml醋酸钠缓冲液（取冰醋酸3.0ml，加水1000ml，加20%氢氧化钠调节pH值4.0）,继续超声5分钟。放冷，用甲醇-醋酸钠缓冲液（8：2）稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，用甲醇-醋酸钠缓冲液（8：2）稀释至刻度，于3000转/分的转速下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液。 对照溶液的制备：取上述供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用甲醇-醋酸钠缓冲液（8：2）稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 取对照溶液20μl，注入高效液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的20%，另取供试品溶液20μl，注入色谱仪，记录色谱图至主成分保留时间的2.5倍。扣除保留时间为1.5分钟左右的烟酸色谱峰及溶剂峰，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，按自身对照法计算杂质峰的含量。 3．1．5 样品提取方法及溶液稳定性 美国药典24版中洛伐他汀片含量测定的供试品溶液是将片粉用乙腈-醋酸钠缓冲液（8：2）超声溶解20分钟。为节约成本，本品的提取溶剂采用甲醇-醋酸钠缓冲液（8：2），此溶剂比甲醇-水（8：2）制备的供试品溶液稳定性好，而先用甲醇提取，后加醋酸钠缓冲液可提高样品的溶解速度。由于样品溶液经0.45μm的滤膜过滤不易得到澄清溶液，故选择离心后取上清液的方法。 将样品分别用甲醇-水（8：2）和甲醇-醋酸钠缓冲液（8：2）溶解，分别在不同时间取样注入色谱仪。比较两种溶剂中样品溶液的稳定性。扣除烟酸峰及溶剂峰，以峰面积归一化法计算杂质含量。放置时间越长，样品溶液的杂质量越多，尤其以保留时间为时间为6.0分及10.5分左右的杂质峰增加最为明显，其他杂质基本无变化。结果见表1。结果表明，醋酸钠缓冲液能明显抑抑制洛伐他汀的降解，也说明供试品溶液需现配现用，减少洛伐他汀的降解。 表1 两种溶剂中样品溶液稳定性的测定结果 样品溶解后放置时间(小时) 杂质峰（%） 杂质峰（%） 总杂质峰（%） 甲醇-水 甲醇-缓冲液 甲醇-水 甲醇-缓冲液 6.0分 10.5分 5.9分 10.4分 0 0.15 0.06 0.12 0.07 0.74 0.7