生物分离工程重点.docVIP

生物分离工程：是指从发酵液、酶反应液或动植物细胞培养液 中分离、纯化生物产品的过程。它描述了生物产品分类里、纯化过程的原理、方法和设备。因为它处于整个生物产品过程的后端，所以也称为生物工程下游技术。 生物分离工程的一般流程： （1）发酵液的预处理：主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。过滤和离心是发酵液预处理最基本的单元操作。 （2）产物的提取：可采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 （3）产物的精制：（高度纯化）主要是除去与目标物性质相近的杂质。这一阶段的单元操作涉及色谱分离技术有层析（包括柱层析和薄层层析）、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 （4）成品的加工处理：单元操作主要由浓缩、结晶和干燥。 3.生物分离过程的体系特殊： （1）原料液的特点：生物分离与纯化处理的原料液体系十分复杂，含有为生物细胞、菌体、代谢产物、未耗用的培养基以及各种降解目标产物的杂质；原料液中常存在与目标分子在结构等理化性质上及其相似的分子及异构体，形成用普通方法难于分离的混合物；除少数特定的生化反应系统，原料液是产物浓度很低的水溶液；原料液低于环境变化（热、pH药物等）的能力差，溶液发生活性降低甚至丧失（变性失活）。 （2）对产物的要求：在分离纯化过程中必须保持目标物的生物活性；粗产物的纯度较低，而最终产品要求的纯度却极高；用作医药、食品和化妆品的生物产物与人类生命息息相关，要求最终产品的质量必须符合药典、试剂标准和食品规范等国家标准。 4.发酵液预处理的方法：按预处理的目的分为：提高过滤速度的方法（凝集和絮凝）、改变发酵液性质的方法（调节pH法）和杂质去除的方法三类。其具体的方法有凝集和絮凝、加热法、调节pH法、加水稀释法、加入助滤剂法、加吸附剂法或加盐法、高价态无机离子去除的方法、可溶性杂蛋白质去除的方法、色素及其他杂质去除的方法等。 5.凝集：是指在投加的化学物质（如水解的凝集剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。其中凝集剂的作用，有些是对初始粒子表面电荷的简单中和，有些是消除粒子表面稳定的双电荷层，还有些是通过氢键或其他复杂的形式与粒子相结合，并最终使胶体粒子的排斥电位降低而发生聚沉。 6.絮凝：是指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。絮凝在发酵液预处理中的作用是增大发酵液中悬浮粒子的体积，提高固液分离速度和滤液质量。 7.p14.发酵液的预处理方法中的调节pH法，在进行pH调节时，一般采用草酸等有机酸或某些无机的酸碱来进行。调解室还要尽量避免过酸或过碱，防止发酵产物的破坏和损失。 8.p15.高价态无机离子去除的方法：a.Ca2+的去除经常采用的酸化剂为草酸；b.Mg2+的去除是采用磷酸盐，使之生成磷酸镁沉淀的方法；c.Fe3+的去除通常采用加入黄血盐，生成普鲁士蓝沉淀的方法而除去。也可采用加入碱化剂（如NaOH、Na2CO3、NH4OH等）生成Fe(OH)3沉淀而除去铁离子。 9.p17.对于发酵液中体积较小的细菌和酵母菌体一般采用离心分离的方法；而对细胞体积较大的丝状菌，如霉菌和放线菌的分离，一般采用过滤的方法。 10.发酵液的过滤速度与菌体细胞的体积大小、发酵时的条件有关外，还与发酵本身有密切的关系，其主要影响因素是菌种和发酵液黏度两个方面。通常发酵液黏度越大，分离速度越慢。 11.p18.错流过滤：是指料液流动的方向与过滤介质平行的过滤。其常用的过滤介质为微孔滤膜或超滤膜，主要适用于悬浮粒子细小的发酵液，如细菌发酵液的过滤。但其滤膜易被污染应经常清洗。 12.p23.发酵液过滤设备按过滤的推动力分为重力式过滤器（主要应用于啤酒麦芽汁制备过程的麦汁过滤）、压力式过滤器、真空式过滤器和离心式过滤器四种。 国内外对发酵液的分离和过滤常采用的设备为板框式压滤机、板式压滤机、自动板框式压滤机和真空过滤机4种。 (1)板框式压滤机：间歇式过滤机，广泛应用于培养基制备的过滤及霉菌、放线菌、酵母菌和细菌等多种发酵液的固-液分离。 13.p27.转筒真空过滤机的工作原理： 14.p34.细胞破碎的方法较多，根据破碎机理不同，可分为机械破碎法、物理破碎法、化学渗透法以及酶溶法4种 （1）机械破碎法包括珠磨法、高压匀浆法及超声波破碎法等。 （2）化学渗透法师有选择性的加入某些化学试剂，改变细胞壁或膜的通透性的，而使胞内的物质有选择性的渗透出来的一种方法。传统的化学渗透剂包括酸碱、盐、表面活性剂、有机溶剂、变形剂、螯合剂等。变性剂的加入（如盐酸胍和脲）的加入，可削弱氢键的作用，使胞内产物相互之间的作用力减弱，从而易于释放。 （3）物理破碎法包括冻融法、低温玻璃化法。 15.p39.各种破碎方法的比较及选择 分