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TGF-β1对MSCs体外模拟缺血性损伤的保护作用 　　作者：郑丽芳 作者单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科,湖北 武汉 430022 　　【摘要】 目的 观察转化生长因子Β1(TGF-Β1)对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外模拟缺血性损伤的保护作用。方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第3代的MSCs进行鉴定;用1、2、5 Μg/L 的TGF-Β1分别预处理细胞8 h,然后用血清剥夺和低氧(SOD)处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价MSCs的凋亡及存活情况;用Western blot方法检测2 Μg/L的TGF-Β1对Akt和p-Akt表达的影响。结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫荧光检测显示培养的细胞CD29表达阳性,而CD34表达阴性。用2 Μg/L的TGF-Β1预处理MSCs后,可抑制SOD诱导的细胞凋亡,其早期凋亡率和中晚期凋亡率均明显下降,与凋亡模型组相比差异具有显著性(F=199.77、232.82,P0.05),而PI3K抑制剂Wortmannin能明显抑制TGF-Β1的抗凋亡作用。2 Μg/L的TGF-Β1可升高p-Akt的表达,p-Akt在8 h达到高峰,p-Akt/Akt显著增高,和其他时间点相比差异具有显著性(F=6.306,P0.05)。结论 TGF-