化妆品中地氯雷他定等15种物质的检测方法（征求意见稿）.doc

附件3 化妆品中地氯雷他定等15种物质的检测方法 （征求意见稿） 1 范围 本方法规定了采用高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中地氯雷他定等15种物质的含量。 本方法适用于膏霜、乳液、水剂和啫喱等类型化妆品中地氯雷他定等15种物质的含量的测定。 本方法所指的15种物质为地氯雷他定、氯苯那敏、阿司咪唑、曲吡那敏、溴苯那敏、苯海拉明、异丙嗪、羟嗪、奋乃静、西替利嗪、氟奋乃静、氯丙嗪、氯雷他定、特非那定和赛庚啶。 2 方法提要 以甲醇为溶剂提取化妆品中抗组胺类物质，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 本方法对15种抗组胺类物质的检出限均为1 ng/mL，定量下限均为2 ng/mL，如以取样0.2 g计，检出浓度均为250 ng/g，定量下限浓度均为500 ng/g。 3 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为一级实验用水。 3.1 甲醇，色谱纯。 3.2 甲酸，色谱纯。 3.3 甲酸铵，色谱纯。 3.4 甲酸铵-甲酸水溶液：称取甲酸铵（3.3）6.3 g，加1 mL甲酸（3.2），加水1000 mL溶解，用0.22 μm滤膜过滤。 3.5 标准品，参考附录A。 3.6标准储备溶液（ρ=1 g/L）：分别准确称取15种抗组胺标准品各10 mg（必要时需折算），精确到0.0001 g，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容。 3.7 混合标准储备溶液（ρ=2.5 mg/L）：准确移取各标准储备液25 μL至10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容。 4 仪器和设备 4.1高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 超声波清洗器。 4.3 0.22 μm滤膜。 4.4 离心机，10000 r/min。 4.5 涡旋振荡器。 4.6 天平。 注：由于部分吩噻嗪类抗组胺物质在个别高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪上有吸附现象，这可能与其中的金属管道种类和仪器清洗有关，因此在实验时应确认仪器没有影响实验结果的吸附存在。 5 分析步骤 5.1 混合标准系列溶液制备 用甲醇（3.1）稀释混合标准储备溶液，精密配制得浓度为2，5，10，20，50 ng /mL的系列浓度标准溶液。标准溶液现用现配。 5.2 样品预处理 准确称取样品0.2 g，精确至0.001g，置于具塞比色管中，加入甲醇（3.1）40 mL，涡旋振荡30 s，使试样与提取溶剂充分混匀，超声提取20 min（工作频率20～43KHz，200 W），用甲醇（3.1）定容至50mL，摇匀，必要时以10000 r/min离心5 min。取上清液经0.22 μm滤膜过滤，滤液作为试样溶液备用。必要时用适量甲醇（3.1）稀释滤液备用。 5.3参考色谱-质谱条件 5.3.1 色谱条件 色谱柱： 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 (3.0 μm, 3.0×150mm)。 流动相：溶液A：甲酸铵-甲酸水溶液（3.4），溶液B：甲醇（3.1），梯度程序： 时间/min V（流动相A）/% V（流动相B）/% 0 50 50 4 50 50 6 35 65 14 0 100 16 0 100 16.1 50 50 20 50 50 流速：0.4 mL/min； 柱温：35 ℃； 进样量：2 μL； 样品盘温度：4 ℃； 5.3.2 质谱条件 离子源： 电喷雾离子源（ESI源）； 监测模式： 正离子多离子反应监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表1 雾化气流速：3 L/min； 干燥气流速：15 L/min； 脱溶剂管温度：250 ℃； 离子源加热温度：400 ℃； 碰撞气：Ar，230 kPa； 离子化电压：4500 V 表1谱监测离子对及相关电压参数设定表 编号 物质名称 母离子（m/z） 子离子（m/z） CE（V） 1 地氯雷他定 311.1 259.1* 22 294.1 18 2 氯苯那敏 275.1 230.1* 15 167.1 42 3 阿司咪唑 459.3 135.1* 38 218.1 26 4 曲吡那敏 256.2 211.1* 14 91.1 35 5 溴苯那敏 319.1 273.9* 18 167.0 43 6 苯海拉明 256.2 167.1* 13 165.0 45 7 异丙嗪 285.1 86.2* 20 198.0 22 8 羟嗪 375.2 201.0* 20 166.1 39 9 奋乃静 404.2 171.1* 24 143.2 29 10 西替利嗪 389.1 201.0* 20 166.1