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蒙药多糖的研究进展.doc
蒙药多糖的研究进展
摘 要:本文综述了蒙药中多糖类成分的提取方法,含量测定方法及其生物活性等。通过对这些提取方法、测定手段与生物活性进行综合性的论述与分析,对其发展进行了展望,为开发利用蒙药多糖提供一定的科学借鉴依据。
关键词:蒙药;多糖;研究进展
DOI:10.16640/j.cnki.37-1222/t.2016.10.240
0 前言
研究表明,从蒙药中提取的多糖类成分具有抗肿瘤、抗氧化、抗辐射、降血脂、降血糖及增强免疫力等生理活性;所以从蒙药中提取出多糖类成分及测定其含量对蒙药开发利用有着十分重要的意义。本文介绍了近年来蒙药中多糖类成分的提取方法及含量测定方法,并对蒙药多糖的生理活性进行了综述,以作为今后的研究提供有效的科学依据。
1 蒙药中多糖的提取方法
1.1 水提醇沉法
多糖是极性较大的高分子化合物,提取溶剂选择水是因为水的极性较强。用水作为溶剂提取多糖时,将提取液浓缩,加入乙醇,使多糖从提取液中沉出。用水提醇沉法,提取蒙药水溶性多糖的研究报道很多[1-2]。影响多糖提取效率的因素有: 用水量、提取温度、提取时间、提取次数等,可通过优化工艺条件来提高多糖的提取率。
1.2 酸提法
酸提法是将蒙药粉末与稀酸溶液混合,在一定温度下提取数小时后过滤,取滤液浓缩,并加入一定量乙醇,所得沉淀即为酸提多糖[3-4]。由于溶液中的H+抑制了酸溶性杂质的溶出,酸提法得到的多糖化合物纯度较高,但在酸性条件下会引起多糖中糖苷键的断裂,导致多糖提取率下降,所以运用酸提法提取蒙药多糖时,一定要控制好酸度和温度。
1.3 醇碱提取法
醇碱提取法是一种新兴的多糖提取方法。该法是按照一定的比例向样品中加入碳酸钠-乙醇溶液,在一定温度下提取,将提液过滤,浓缩,最后用乙醇沉淀来获得多糖[5]。醇碱提取法残渣中多糖的残留量较低,提取效果较好,在实际生产中有着广阔的应用前景。
1.4 酶提取法
酶法是通过酶促反应,加速蒙药中有效成分的释放,使多糖的提取率增加。酶法分为单一酶法和复合酶法。酶法具有条件温和[6]、易于去除杂质、回收率高和节能等优点,因此酶法提取蒙药多糖的应用前景十分广阔。由于酶具有专一性和选择性的特点,应用时多采用复合酶。
1.5 超声提取法
超声提取法是利用超声波对有机大分子的破坏能力,加快多糖的析出,从而提高提取效率,缩短提取时间,利用超声波提取了广枣、黑木耳、花生、阿尔泰狗娃花等多糖。超声提取法是一种实用高效的提取方法。
1.6 微波取法
微波提取法的原理是当微波透过细胞壁作用到细胞内部时,能量被细胞吸收,使细胞内压力超过了细胞壁的承受能力,细胞壁迅速破裂形成微孔,使细胞内的多糖释放到溶液中。高岐已用微波法提取了广枣中多糖。
2 蒙药中多糖含量的测定方法
2.1 比色法(分光光度法)
比色法使用历史悠久,目前已广泛应用于多糖含量测定,特别是苯酚 -硫酸法和蒽酮 -硫酸法应用最广。
(1)苯酚-硫酸法的基本原理是利用糖类在浓硫酸作用下,水解生成糠醛或其衍生物,可与苯酚试剂缩合产生颜色物质,于 480 ~ 490 nm处有特征吸收,其颜色深浅与糖的浓度成线性关系[7],该方法被广泛使用。
(2)蒽酮-硫酸法测定多糖含量是利用多糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并可以脱水生成羟甲基糠醛,羟甲基糠醛与蒽酮络合成蓝色化合物, 其颜色深浅与糖的浓度成线性关系。利用蒽酮-硫酸法测定蒙药驴耳风毛菊多糖的含量和蒙药荨麻多糖的含量[8]。
比色法用于测定多糖含量简单易行,且重复性、精密度、回收率等均非常好。
2.2 滴定法
滴定法原理是利用多糖能水解成具有还原性,然后直接进行还原滴定。采用多糖经乙醇沉淀分离后,加酸、加热水解成单糖,以次甲基蓝作指示剂, 滴定经标定过的碱性酒石酸铜溶液,根据样液消耗的体积,计算其含量。此方法快速,不需精密仪器,对所有多糖均可适用。
2.3 高效液相色谱法(HPLC法)
HPLC法测定多糖的各组分单糖含量,各单糖含量之和为总糖含量。HPLC还可以测定多糖的分子量分布情况。HPLC法有分析速度快,分离效能好、选择性强、灵敏度高等方面的优点。
2.4 气相色谱法(GC法)
GC法可定性、定量分析多糖的组分及含量,一般是将多糖酸水解后衍生物法以增加其挥发性,来测定多糖的各组分单糖含量,各单糖含量之和为总糖含量。
3 蒙药多糖的活性
蒙药多糖主要应用于抗肿瘤、抗凝血、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血脂、降糖及增强免疫力等方面。
3.1 增强免疫力
研究表明,目前发现的大多蒙药多糖类成分都具有一定的免疫调节活性,是一类非特异性的
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