新步步高高考生物（苏教版）大一轮复习讲义课件：第11单元生物技术实践第40讲.pptx

第40讲　无菌操作技术实践栏目索引考点一　微生物的分离和培养考点二　分离特定的微生物并测定其数量考点三　植物组织培养技术知识网络　答题语句探究高考　明确考向练出高分考点一　微生物的分离和培养考纲要求微生物的分离和培养。解题探究知识梳理返回总目录1.相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在 内，在 ℃下加热 h以达到灭菌的目的。②湿热灭菌法常采用 进行，其使用包括加水、 、 、 、出锅等步骤。 干热灭菌箱160～170 1～2 高压蒸汽灭菌锅加热排气保温保压装锅答案知识梳理(2)培养基的配制①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物 的营养基质。②营养组成：一般都含有 、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入 等特殊的营养物质，并要调节培养基中 使之满足微生物生长的需要。生长、繁殖或积累代谢产物水碳源氮源pH维生素答案③种类： 培养基和 培养基，前者的主要优点是 ，缺点是营养成分 ；后者的优点是 ，缺点是 。(3)微生物的接种①接种：是指在 条件下将微生物接入 的操作过程。②常用的工具有 等，在涂布平板接种时要用 ，穿刺接种时要用接种针，在 或在固体培养基平板上进行 时要用接种环。取材便利、天然合成营养丰富、配制简便难以控制、实验结果的重复化学成分及其含量明确，实验的可重复性好性较差配制繁琐、成本较高无菌培养基玻璃涂布器、接种针、接种环玻璃涂布器斜面接种划线接种答案2.大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的： 、 和 等。②主要步骤：准备接种→ → →挑取少许菌种→ →在 中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 ℃)保存。菌种转移保存纯净菌种扩大培养接种环灭菌试管口灭菌37℃恒温箱划线接种答案a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程： 。b.甲、乙、丙中的灭菌方法是 。c.丁中的操作需要等待 后才能进行。②平板划线法是指用带有微生物的 在平板培养基表面通过 而纯化分离微生物的一种方法。丙→乙→甲→丁灼烧灭菌平板冷却凝固接种环分区划线答案(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板制作的方法及注意事项诊断与思考1.判断下列说法的正误(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(　)(2)培养基分装到培养皿后进行灭菌(　)(3)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(　)(4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(　)×××√答案(5)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(　)(6)下面图中甲为平板划线法中最重要的环节，乙为操作的结果：①每一次划线后都要将接种环灼烧(　)②除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端(　)(7)用涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(　)√√×√答案2.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考：(1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？提示　获得效果A的接种方法为涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法。答案(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？提示　最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。返回答案题组一　培养基及其制备方法分析1.下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是(　)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mLA.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C.该培养基缺少提供生长因子的物质D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用123456解析答案解题探究解析　分析表中成分可知，该培养基中没有凝固剂，为液体培养基，该培养基的营养成分齐全，但存在伊红、美蓝等鉴别物质，属于鉴别培养基，A项错误；该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源，B项正确；该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子，C项错误；培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后，才能使用，D项错误。答案　B123456(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入______作为凝固剂，从