谈不同比例士的宁对马钱子碱体外经皮渗透性质的影响.docVIP

谈不同比例士的宁对马钱子碱体外经皮渗透性质的影响 　马钱子又名番木鳖，为马钱科马钱属植物马钱(Strychnosnux-vomica L.)或云南马钱(S.pierriana A.W. Hill)的干燥成熟种子，主要有效成分为生物碱类。包括士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物、异马钱子碱、伪马钱子碱等，约占总量1%-5%。其中士的宁和马钱子碱约占总生物碱的70%。马钱子生物碱作用于免疫、神经、心血管等系统，具有抗炎及免疫、镇痛、抗肿瘤等显著疗效。主要有效成分马钱子碱具有很强的抗炎镇痛和关节炎滑膜细胞增殖抑制作用，而士的宁在抗炎镇痛方面活性较差，且毒性较强，其口服中毒量是马钱子碱的1/71。因此马钱子制剂中士的宁的含量会直接影响制剂的药效及毒性。 　　研究表明，马钱子制成经皮给药制剂对风湿痹症等具有较好疗效，但其毒性，尤其是士的宁是亟待解决的问题之一。为达到治疗的“增效减毒”，本实验利用体外经皮扩散方法，探讨士的宁与马钱子碱在不同比例下，马钱子碱的经皮扩散行为，为马钱子的炮制及其经皮制剂的研究等应用方面提供参考依据。 　　材料 　　1. 动物 　　清洁级雄性ICR小鼠30只，体质量(20.0plusmn;3.0)g，浙江省实验动物中心提供，合格证号：SCXK(浙)2008-0033。 　　2. 仪器 　　1200 Agilent高效液相色谱(美国Agilent公司);RYJ-12B药物透皮扩散试验仪(上海黄海药检仪器有限公司);XS205电子微量天平(瑞士Mettler Toledo公司);STARTER2100酸度计(美国OHAUS公司)。 　　3. 试药 　　马钱子碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110706-200505，纯度95.9%);士的宁对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110705-200306，纯度97%);马钱子碱纯品(南京泽朗植提技术有限公司，批号：ZL110116，纯度97.2%);士的宁纯品(南京泽朗植提技术有限公司，批号：ZL110120，纯度96.2%);马钱子购于杭州华东中药饮片有限公司，批号：101011，经该公司质检科郑霄鹰主管药师鉴定为马钱科植物马钱子(Strychnos nux-vomica.L.)的干燥成熟种子;马钱子总生物碱提取物1(自制，批号马钱子碱含量94.1%);马钱子总生物碱提取物2(自制，批号马钱子碱含量27.01%，士的宁含量2 6 .95%，总生物碱含量67.38%)。乙腈(美国Tedia公司，批号色谱纯);其他试剂均为分析纯。 　　方法 　　1. 透皮接受液中马钱子碱、士的宁的含量测定方法研究 　　1.1 色谱条件 　　色谱柱：Agilent SB-C18柱(4.6mmtimes;150mm，5mu;m);流动相：乙腈-0.01moL/L庚烷磺酸钠与0.02moL/L磷酸二氢钾等量混合(10%磷酸调pH值为2.80)(21∶79);流速：1.0mL/min;检测波长：260nm;进样量：20mu;L;柱温：室温。 　　1.2 对照品溶液的制备 　　精密称量马钱子碱、士的宁对照品适量，甲醇溶解，流动相稀释至浓度分别为38.80、45.20micro;g/mL。 　　1.3 供试品溶液的制备 　　取透皮接受液，0.45mu;m微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。 　　1.4 标准曲线 　　取“1.2”项下对照品溶液，分别进样5、10、15、20、30、40、50、60mu;L，在上述色谱条件下进行检测。相应对照品峰面积(Y)为纵坐标，进样量(X)为横坐标进行线性回归，得到马钱子碱回归方程Y=1 767.7X-39 093，r=0.9999，马钱子碱在0.194-2.328mu;g内线性关系良好。得到士的宁回归方程Y=2 352.3X-2 9943，r=0.9929，士的宁在0.226-2.712mu;g内线性关系良好。 　　1.5 仪器精密度试验 　　精密吸取对照品溶液，连续进样6次，计算峰面积的RSD值分别为0.19%，0.18%，说明仪器精密度良好。 　　1.6 重复性试验 　　平行制备供试品溶液6份，进样检测，计算马钱子碱和士的宁的RSD值均为0.32%。说明此方法的重复性良好。 　　1.7 加样回收率试验 　　精密量取已知含量马钱子碱18.79mu;g/mL，士的宁3.57mu;g /mL的上述供试品溶液6份，每份0.5mL，各加0.2mL混合对照品溶液，流动相定容至2mL，在上述色谱条件下进行检测，计算回收率，结果见表1。测得马钱子碱和士的宁的平均回收率为96.74%，99.28