谈复方紫草油对湿疹模型小鼠血清IL-2、TNF-α 水平的影响.docVIP

谈复方紫草油对湿疹模型小鼠血清IL-2、TNF-α 水平的影响 　　湿疹是皮肤科常见病，病情迁延难愈。目前常用的皮质类固醇激素、抗组胺药等药物控制症状效果良好，但停药后易复发。我院采用复方紫草油治疗成人以及婴儿湿疹临床取得良好疗效，现用小鼠建立湿疹动物模型，探讨其作用机制，报道如下。 　　1 实验材料 　　1.1 实验动物ICR 系小鼠，雄性，平均体质量25.811.55g，浙江中医药大学实验动物中心提供，合格证：SCKX(沪)2013-0016。 　　1.2 实验药物2、4 二硝基氯苯(DNCB)(东京仁成工业株式会社，批号C0162)，适量DNCB 加入丙酮配制成7%、0.1%浓度的两种溶液。丁酸氢化可的松软膏(天津金耀药业有限公司,批号1503559)。复方紫草油(紫草、黄芩、生大黄、麻油、亚麻籽)加热80℃，15~20min(以紫草轻度变焦炭为度)，待油冷却后过滤，备用。 　　1.3 仪器离心机：北京医用离心机厂，FA-B 型电子天平：湖北好美佳仪器设备有限公司，皮肤圆形打孔器(直径8mm)：上海医疗设备厂，电子数显卡尺：桂林量具刃具厂。 　　1.4 试剂鼠IL-2、TNF-alpha; 试剂盒(批号E2015120903、E2015120907)。 　　2 实验方法 　　2.1 造模参照文献方法，取小鼠60 只，按完全随机设计原则，分为空白对照组(空白组)、2，4-二硝基氯苯模型组(模型组)、50%中药低浓度组(中低组)、100%中药高浓度组(中高组)、丁酸氢化可的松乳膏西药对照组(西药组)，每组12 只，用7%的2,4-DNCB 溶液在小鼠的背部及腹部剪毛区域致敏，第二天加强致敏1 次。5 天后，小鼠左耳廓均匀涂1%DNCB 溶液，每隔3 天激发1 次，共激发4 次，并分别于每次激发后24h 用螺旋测微器测定小鼠耳肿胀度。中低组、中高组和西药组分别以相应浓度的药液给小鼠耳部外涂治疗，每天2 次，连续12 天，空白组以及模型组未给予特殊处理。 　　2.2 观察指标末次给药后2h，剪下小鼠双耳，用直径8mm 的皮肤打孔器分别在左右耳对称部位打下圆形耳片,测量圆形耳片厚度,称重,分别记录左右耳片的厚度、质量，计算耳片厚度差和质量差。采血测IL-2、TNF-alpha;(ELISA 法)水平(详细操作按试剂盒说明书进行)。 　　2.3 统计学方法所得数据用SPSS19.0 统计软件进行方差分析，组间差异用q 检验。 　　3 实验结果 　　3.1 各组小鼠耳片质量及厚度比较中高组小鼠耳片重量和厚度差与中低组和模型组比较，差异有统计学意义(Plt;0.05)，与西药组比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 　　3.2 各组小鼠血清IL-2、TNF-alpha; 含量比较中高组小鼠血清IL-2、TNF-alpha; 低于中低组和模型组(Plt;0.05)，与西药组比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 　　4 讨论 　　湿疹为皮肤科常见疾病，中医称之为“浸淫疮”，“湿毒疮”，等。病因病机总属湿热内外相搏，蕴蒸外发，浸淫肌肤,滋水流溢成疮。 　　复方紫草油为我院名中医高宜云医师验方。方中主药紫草凉血，活血，解毒透疹，在清代《疡医大全》中早有记载紫草膏治小儿胎毒，疥癣。黄芩清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎。生大黄清湿热、泻火、凉血。亚麻籽又称大胡麻能润燥，祛风，止痒。麻油清热、润滑、收敛、润肤，作为油膏制剂之溶媒可补气行气、健脾生肌。诸药合用有清热凉血，燥湿止痒，润肤之效。药理研究表明，紫草含萘醌类色素和多糖类化合物，具有抗细菌、抗真菌作用，并具有明显抗炎，抑制组胺释放等作用，同时能抑制TNF-alpha; 的表达。黄芩具有抗菌、抗病毒、抗炎作用同时对多种变态反应有不同程度的抑制作用。生大黄具有抗菌，抗炎等作用，同时能抑制炎症细胞因子TNF-alpha; 表达。亚麻籽含大量亚油酸和亚麻酸等成分，是维持皮肤和毛发生长不可缺少的成分，能促进损伤组织的修复。麻油含有多种脂溶性维生素E，能维护毛细血管的通透性，改善周围血液循环。全方有抗菌，抗炎，抗过敏，抑制渗出，减少水肿的作用。 　　湿疹致病原因复杂，其发病机制可能与Ⅳ型变态反应有关，Ⅳ型变态反应与致敏的T 淋巴细胞有关，其产生一系列淋巴因子，各种炎症细胞活化因子共同引起血管扩张，血管壁通透性增强从而形成皮肤湿疹样改变，湿疹发生发展过程中，炎症介质的相互作用和变化能影响湿疹的发展和预后。TNF-alpha;属于促炎因子之一，TNF-alpha; 含量增高不仅可促进炎症部位血管扩张、血管壁通透性增加、趋化白细胞引起炎症部位组织损伤，导致炎症程度加重，同时，还可引起IL-1、IFN-gamma; 等促炎因子含量增加，