谈安神补脑液去除维生素B1前后对小鼠镇静、催眠作用及脑内RNA，DNA，蛋白质合成影响的比较.docVIP

谈安神补脑液去除维生素B1前后对小鼠镇静、催眠作用及脑内RNA，DNA，蛋白质合成影响的比较 　　从国外大多数流行病学调查结果来看，大约每年有33% 的人出现不同程度的睡眠障碍，并且有17%的人出现严重失眠。中国卫生部一项统计资料显示，目前，国内失眠者人数已经达到120 ～140 万，据专家估计，到2020 年，全球约有7 亿多失眠者。安神补脑液是由干姜、制何首乌、淫羊藿、大枣、鹿茸、甘草、维生素B1( VB1) 组成的复方制剂，具有健脑安神，生精补髓，益气养血的功效，用于神经衰弱、失眠、健忘、头晕等疗效显著。为进一步探讨VB1对安神补脑液镇静、催眠作用的影响，笔者对安神补脑液、不含VB1的安神补脑液以及VB1口服液在镇静、催眠方面的作用效果进行了比较，同时观察了不同工艺制备样品对小鼠脑内RNA，DNA，蛋白质合成的影响，为优化安神补脑液的制剂工艺提供理论依据，同时，促进其在临床上的合理应用。 　　1 材料 　　1. 1 动物ICR 小鼠，雄性， 19 ～ 22 g，由北京市维通利华实验动物有限公司提供，动物合格证号SCXK( 京) 2012-0001。 　　1. 2 药物及试剂安神补脑液( 吉林敖东延边药业股份有限公司，批号1107059) ，不含VB1的安神补脑液( 吉林敖东延边药业股份有限公司，批号1107002) ，VB1口服液( 吉林敖东延边药业股份有限公司，批号1107001) ，戊巴比妥钠( 上海化学试剂公司，批号84-06-12) ，二苯胺( 国药集团化学试剂有限公司，批号X ，氢氧化钠( 北京鼎国生物技术有限责任公司，批号79H10205) ，三氯化铁( 天津市光复科技发展有限公司，批号2013. 06. 24)浓盐酸( 北京化工厂，批 。 　　1. 3 仪器YLS-1A 型多功能小鼠自主活动记录仪( 济南益延科技发展有限公司) ，DY89-Ⅱ型电动玻璃匀浆机( 宁波新芝生物科技股份有限公司) ，M1000 型多功能连续波长酶标仪( 美国BiotekInstruments 公司) ，HH-2 型数显恒温水浴锅( 国华电器有限公司) ，MP21001 型电子天平( 上海舜宇恒平科学仪器有限公司) 。 　　2 方法 　　2. 1 对小鼠自主活动的影响ICR 小鼠经适应性饲养1 d 后，利用自主活动仪进行实验动物的筛选，筛选时先将小鼠置于自主活动仪内适应5 min，之后测试10 min 内小鼠自主活动次数，选择活动次数相近的70 只小鼠，按体重随机分为7 组: 正常组( 蒸馏水) ，安神补脑液高、低剂量组( 0. 1，0. 05 g·kg - 1 ) ，不含VB1的安神补脑液高、低剂量组( 0. 1， 0. 05 g·kg - 1 ) ，VB1口服液高、低剂量组( 0. 1，0. 05 g·kg - 1 ) ，每组10 只。每日按体重ig 给药1 次，连续ig 10 d。第10 天称重，给药1 h 后，将小鼠置于自主活动仪内，再次检测小鼠自主活动次数。 　　2. 2 对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响ICR小鼠70 只经适应性饲养1 d 后，按体重随机分为7 组，分别为正常组( 蒸馏水) ，安神补脑液高、低剂量组( 0. 1，0. 05 g·kg - 1 ) ，不含VB1的安神补脑液高、低剂量组( 0. 1，0. 05 g·kg - 1 ) ，VB1口服液高、低剂量组( 0. 1， 0. 05 g·kg - 1 ) ，每组10 只。每日按体重ig 给药1 次，连续ig 10 d。第10 天给药后1 h，动物ip 戊巴比妥钠溶液( 65 mg·kg - 1 ) ，记录小鼠发生睡眠潜伏期和睡眠时间。 　　2. 3 对小鼠脑组织RNA，DNA，蛋白质含量的影响ICR 小鼠70 只经适应性饲养1 d 后，按体重随机分为7 组，分别为正常组( 蒸馏水) ，安神补脑液高、低剂量组( 0. 1， 0. 05 g·kg - 1 ) ，不含VB1的安神补脑液高、低剂量组( 0. 1， 0. 05 g·kg - 1 ) ，VB1口服液高、低剂量组( 0. 1，0. 05 g·kg - 1 ) ，每组10 只。每天动物按体重灌胃给药1 次，连续ig 10 d。末次给药后1 h，迅速将小鼠断头处死，取脑，匀浆，提取脑内RNA，DNA，蛋白质，按Orcinol 法测定脑组织中RNA含量、二苯胺显色法测定脑组织中DNA 含量，Lowry法测定脑组织中蛋白质的含量。 　　2. 4 统计学分析采用SPSS 13. 0 软件，数据以珋x plusmn; s表示，组间比较采用t 检验，以P lt; 0. 05 为差异有统计学意义。 　　3 结果 　　3. 1 对小