谈煎煮时间与甘草配伍剂量对马钱子中生物碱含量的影响.docVIP

谈煎煮时间与甘草配伍剂量对马钱子中生物碱含量的影响 　　马钱子为马钱科植物马钱( Strychnos nux - vomicaL) 或云南马钱( Strychnos Pierriana A. W. Hil) 的干燥成熟种子。性寒，味苦，有剧毒。功能为解毒消肿，开通经络，透达关节。为临床活血疗伤常用中药，传统用于风湿顽痹、麻木瘫痪和跌打损伤等。但由于其有剧毒，即使经过炮制，大剂量应用仍存在一定风险，因而限制了其临床应用。 　　马钱子中主要含有士的宁( strychnine) 、马钱子碱( brucine) 、beta; - 可鲁勃林( beta; - colubine) 等多种生物碱，其中士的宁和马钱子碱既是主要的有效成分，又是毒性成分。现代研究证实，士的宁和马钱子碱在炮制过程中转化为氮氧化合物，也可转化为其异型结构如异士的宁和异马钱子碱，但主要是氮氧化合物，实验证明士的宁和马钱子碱二者的氮氧化合物的毒性仅分别为原来的1 /10 和1 /5，中毒潜伏期也显著延长，反复抽搐可不致死，并认为炮制既降低了毒性又保留了药理活性，具有相当的意义。 　　马钱子的炮制研究，广大学者已经从各个方面进行了大量的探讨，临床上亦多采用砂烫、油炸等加热方法进行炮制。目前，马钱子在用法上除按《中华人民共和国药典》要求用于丸、散及外用外，现在也有直接用于汤剂入药的。因此对于长时间的煎煮是否会对马钱子中所含生物碱的含量产生影响，仍需我们进一步研究。 　　因马钱子为毒性中药，即使经过炮制，大剂量应用仍存在一定风险。故临床除炮制外，亦多配伍使用，配伍应用正是有毒中药降低毒性、增加疗效的有效途径。其中与甘草配伍较为普遍，临床上也有用甘草煎汤连续内服可使马钱子中毒症状减轻的报道。因此，如何通过配伍以降低毒性，并最大限度地发挥其特长，有着重要的临床意义。 　　1 仪器与材料 　　1. 1 仪器 　　岛津高效液相色谱仪，Hypersil BDS C18柱( 4. 6mm times; 250 mm，5. 0 mu;m) ; 分析天平AUW220D( 十万分之一) ; 电热恒温水浴锅MWY - Z - 57 SW。1. 2 材料和试剂马钱子、甘草购自安国药材市场，为《中华人民共和国药典》( Ⅰ部) 收载品种。马钱子碱( 批号110706- 200505) 、士的宁( 批号110705 - 200306) 购自于中国药品生物制品鉴定所。所用试剂为色谱纯或分析纯。 　　2 方法与结果 　　2. 1 不同煎煮时间对马钱子中生物碱含量变化的影响 　　2. 1. 1 对照品溶液的制备精密称取士的宁对照品6. 16 mg、马钱子碱对照品5. 15 mg，分别置于10 mL 容量瓶中，加氯仿适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2 mL，置同一10 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制士的宁0. 123 mg /mL、马钱子碱0. 105 mg /mL 的混合对照品储备液。 　　2. 1. 2 色谱分析Hypersil BDS C18柱( 4. 6 mm times; 250mm，5. 0 mu;m) ; 柱温: 室温; 流动相: 乙腈- 0. 01 mol /L庚烷磺酸钠与0. 02 mol /L 磷酸二氢钾等量混合溶液( 用10%磷酸调节pH 值2. 8) ( 21∶ 79) ; 检测波长: 260nm。 　　2. 1. 3 标准曲线的制备精密吸取混合对照品储备液，以甲醇配置浓度分别为: 马钱子碱0. 002、0. 005、0. 013、0. 033、0. 082、0. 206 mg /mL( 共6 个浓度) ，士的宁0. 002、0. 006、0. 016、0. 039、0. 098、0. 244 mg /mL( 共6 个浓度) 。各吸取10 mu;L 注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以峰面积( X) 为横坐标，浓度( Y) 为纵坐标，绘制标准曲线。马钱子碱的回归方程为Y = 6times; 10 - 8 X + 0. 0002，gamma; = 1，表明马钱子碱在0. 002 ～0. 206 mg /mL 之间呈良好的线性关系; 士的宁的回归方程为Y = 5 times; 10 - 8X + 0. 00002，gamma; = 0. 9998，表明士的宁在0. 002 ～ 0. 244 mg /mL 之间呈良好的线性关系。 　　2. 1. 4 供试品溶液的制备称取马钱子生品10 g( 过三号筛) ，置圆底烧瓶中，加水150 mL，加热回流煎煮[控制煎煮温度( 100 plusmn; 2) ℃]，煎煮时间第1 次分别为15、30、60、120 min，第2 次均为30 min，合并两次煎煮液滤过，滤液至250 mL