豫西脂尾羊的血清酯酶与体尺性状的关联分析.docVIP

豫西脂尾羊的血清酯酶与体尺性状的关联分析 　　摘要：运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（PAGE）对豫西脂尾羊血清酯酶（Es）的多态性进行检测和分析。结果表明，在豫西脂尾羊上Es基因座有2个等位基因即Es+和Es-，而且Es+和Es-的基因频率别为0.55和0.45，有3种基因型Es+ +、Es+ -、Es- -，其频率分别为0.425、0.250和0.325。不同基因型西清酯酶对体尺的影响结果表明，在荐高方面，Es+ +基因型显著高于Es+-基因型（P0.05）。在胸围方面，Es+ +基因型极显著高于Es--基因型（P0.05）。Es对其他指标都无显著影响（P0.05）。 　　关键词：豫西脂尾羊；血清酯酶；多态性 　　中图分类号：S826.8+9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2846-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.033 　　豫西脂尾羊在动物分类学中属牛科山羊亚科（Caprovinae）绵羊属（Ovis）[1]，系蒙系绵羊，源于中亚和远东地区，经过豫西人们长期驯化选育而成，因脂尾呈椭圆形，尾尖紧贴尾沟，将尾分为两瓣，下垂于飞节之上；主要分布在原洛阳地区和原南阳地区北部，以临汝县最多，方城县次之，故定名为“豫西脂尾羊”。血液蛋白及同工酶多态性可用于研究畜禽品种遗传结构，探索品种的起源分化，亲缘关系[2]以及与经济性状的相关性，早期检测选种，缩短世代间隔，是血液生化遗传标记的最常用指标，在动物遗传标记领域一直占有十分重要的地位，对品种资源的保存和利用不但提供了有力的工具、有效的方法和丰富的研究资料等理论指导意义，而且在生产上有现实的使用价值[3]。目前，张才骏等[4，5]、马海明等[6]、杨永新等[7]、臧荣鑫等[8]对优良品种绵羊血液蛋白多态性进行了研究。杨俊年[9]、杨慈清等[10]研究表明，血清酯酶的多态性与绵羊生产性能有一定相关性。本研究主要对豫西脂尾羊血清酯酶的多态性进行分析，这对于揭示豫西脂尾羊的种质特性、亲缘关系、品种起源、进化历程等方面均有重要的学术价值，为豫西脂尾羊的选育提高和保种提供科学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　采集40只纯种豫西脂尾羊的新鲜血样5 mL/只，肝素抗凝，低温带回实验室，室温下以1 500 r/min离心20 min，将上层血浆吸入灭菌小瓶，贴好标签置于-20 ℃的冰柜中保存。体尺测量包括体长、体高、荐高、胸围、胸深、胸宽、管围，测量均参考《家畜育种学》的方法测定[11]。 　　1.2 方法 　　按杨广礼[12]的方法制备凝胶，酯酶测定所用凝胶为8%分离胶和3.5%浓缩胶，淀粉酶测定所用凝胶为7.5%分离胶和4%浓缩胶，凝胶的配制成分及用量见表1。以160 V的电压进行15 min的预电泳，然后稳压200 V开始正式电泳，酯酶2.5～3.0 h，淀粉酶4.0～4.5 h。 　　血清酯酶：将电泳后的凝胶用蒸馏水漂洗后，放入酯酶的染色液（a-乙酸萘酯和β-乙酸萘酯各200 mg分别溶于10 mL丙酮和20 mL 0.15 mol/L的pH 7.5的磷酸缓冲液中，用前各取上清液10 mL再加入100 mg固蓝RR盐，用0.15 mol/L的磷酸缓冲液定容至100 mL），在37 ℃保温20 min，取出凝胶用无离子水冲洗，酶带呈紫色和褐色。置入7%的乙酸中保存。对Es的判型是按文献[13，14]的方法进行。即：在15 min以内出现褐色区带的为Es+ +型，虽然出现褐色区带但较模糊的为Es+ -，出现紫红色活性区带的为Es- -。 　　2 结果与分析 　　2.1 血清酯酶（Es） 　　血清酯酶（Es）在豫西脂尾羊中存在多态性，根据显带颜色将其判定为Es+ +、Es+ -和Es- -。血清酯酶3种基因型Es+ +、Es+ -、Es- -的基因型频率分别为0.425、0.250、0.325；血清酯酶有2个等位基因Es+和Es-，Es+和Es-的基因频率分别为0.55、0.45。豫西脂尾羊Es基因型频率和基因频率见表2，可见Es+基因是豫西脂尾羊的优势基因，其频率为0.55。而Es+ +基因型是豫西脂尾羊的优势基因型，其频率为0.425。 　　2.2 血清酯酶多态与体尺性状的关系 　　豫西脂尾羊的不同基因型血清酯酶对体尺指标（体长、体高、荐高、胸围、胸深、胸宽、管围）的影响结果见表3，不同基因型血清酯酶除了对荐高和胸围有显著影响外，对其他指标都无显著影响（P0.05）。在荐高方面，Es+ +基因型显著高于Es+ -基因型，而两者均与Es- -基因型的荐高（61.00）没有显著差异。在胸围方面，Es+ +基因型极显著高于Es- -基因型，而两者均与Es+ -