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银杏内酯对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.doc
银杏内酯对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用
【摘要】 目的:探讨银杏内酯对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将40只SD小鼠随机分为五组,分别为空白组、模型组及银杏内酯低、中、高剂量组。采用一次大剂量酒精灌胃制作小鼠肝损伤模型。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)来评估银杏内酯对小鼠肝脏的作用。结果:模型组血清ALT及AST水平高于空白组,差异均有统计学意义(P0.01),说明动物模型复制成功。银杏内酯中、高剂量组AST、ALT水平低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);模型组肝组织MDA明显高于空白组,SOD明显低于空白组,差异均有统计学意义(P0.01);银杏内酯中、高剂量组肝组织MDA均低于模型组,SOD均高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:银杏内酯对小鼠急性酒精性肝脏氧化损伤有保护作用。
【关键词】 银杏内酯; 酒精; 氧化损伤; 保护作用
中图分类号 R285.5 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2016)24-0160-02
doi:10.14033/ki.cfmr.2016.24.091
酒精性肝损伤已成为继病毒性肝炎后主要肝损伤病因,过量饮酒严重威胁人类健康。银杏内酯是银杏叶中一类重要的活性成分,银杏内酯是强效的特异性PAF拮抗剂,可与PAF竞争受体,发挥保肝的作用[1],银杏内酯具有抗炎、抗氧化、抗过敏等药理作用[2]。本实验通过观察银杏内酯对小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和肝组织肝脏丙二醛(MDA)、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的影响,以明确银杏内酯对肝脏的保护作用,初步探讨其作用机制,为应用于临床提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
实验动物:40只SD雄性小鼠,体重18~22 g,购自三峡大学实验动物中心。主要试剂:银杏内酯购自宜昌康正药业有限公司(规格:2 ml/支,批号:1408143),酒精度42%(V/V)稻花香白酒,湖北稻花香酒业股份有限公司,ALT、AST检测试剂盒,MDA、SOD试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司,全自动生化分析仪(迈瑞BS-350,中国迈瑞公司),离心机(TG16-WS,上海卢湘仪公司)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 将40只SD雄性小鼠按体重随机分为五组:空白组、模型组、银杏内酯低、中、高剂量组,每组8只。
1.2.2 给药方法 空白组、模型组用生理盐水灌胃10 d,银杏内酯低、中、高剂量组小鼠分别采用银杏内酯0.4、0.8、1.6 g/kg灌胃,连续10 d,第11天隔夜禁食后,模型组和银杏内酯各组小鼠白酒灌胃0.016 L/kg(6.72 g/kg),空白组灌胃相同剂量的蒸馏水,3 h后处死。
1.2.3 血清AST、ALT及肝脏MDA、SOD测定 小鼠断头处死后,迅速心脏采血与分离肝脏,-80 ℃保存备用。心脏采血后,13 000 r/min,离心15 min,取血清,在全自动生化分析仪上检测ALT、AST。取肝组织0.3 g,观察其病理变化,将剪碎的肝组织在玻璃匀浆管中匀浆,再将匀浆液离心13 000 r/min,离心10 min取上清液,分装待用,分别按MDA、SOD试剂盒说明书操作,采用考马斯亮蓝法测定肝组织蛋白含量,通过计算可求出样品中的MDA的含量及SOD的活力。
1.3 统计学处理
所得实验数据采用SSPS 11.0进行分析,计量资料用(x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,以P0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 小鼠血清AST、ALT水平比较
模型组血清ALT及AST水平高于空白组,差异均有统计学意义(P0.01),说明动物模型复制成功。银杏内酯各组小鼠血清中ALT和AST水平均低于模型组,随银杏内酯剂量增加,小鼠ALT、AST水平降低。银杏内酯中、高剂量组AST、ALT水平低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),见表1。
2.2 各组肝组织MDA、SOD水平比较
模型组肝组织MDA明显高于空白组,SOD明显低于空白组,差异均有统计学意义(P0.01);银杏内酯中、高剂量组肝组织MDA均低于模型组,SOD均高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),见表2。
2.3 肝组织病理学观察
光镜观察空白组肝组织形态学正常;而模型组可见紊乱的肝细胞索,肝细胞肿胀变性,胞质疏松,胞质内可见大小不一的脂肪空泡和水样变性,小叶内片状坏死,毛细血管及汇管区内胆管胆
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