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2.答题分析: (1)提供体细胞的供体可能为雌性,也可能为雄性, 因此图中A(正常细胞核)的性染色体组成为_______。 常采用_________去核法来去除卵母细胞的细胞核。 ②过程表示将早期胚胎移入受体,其过程为_________。 XX或XY 显微操作 胚胎移植 (2)取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内 的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍 体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。超过10代 继续培养,则其_________(或核型)的稳定性会降低。 遗传物质 (3)克隆动物的细胞核基因来自供体,因此大部分性状 与供体相同,但细胞质基因来自受体(或提供卵母细胞 的个体),即_____________________________会对克隆 动物的性状产生影响,这就决定了克隆动物的性状与 供体不完全相同。 受体细胞的细胞质中的遗传物质 5.(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。 (1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。 (2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是________(填写字母,单选)。 A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子 (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是________________。 (4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是_______________。 (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与________的生物学功能一致。 【解析】本题主要考查基因工程的基本操作步骤和基因工程的应用等相关知识。 (1)合成总cDNA需要提取细胞中的所有mRNA,再通过逆转录过程获得。采用PCR技术扩增HSA基因时,两条引物分别与每条模板链的3′端结合,扩增的方向相反。 (2)因为启动子通常具有物种及组织特异性,所以在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA时,需要选择水稻胚乳细胞的启动子。 (3)农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,酚类物质可以吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因的转移。 (4)水稻是具有生物膜系统的真核生物,水稻细胞能对初始rHSA多肽进行高效加工,而大肠杆菌是原核生物,原核细胞中没有内质网、高尔基体等具膜结构的细胞器,不能对初始rHSA多肽进行高效加工。 (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与天然的HSA生物学功能一致。 答案:(1)总RNA(或mRNA) (2)B (3)吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化 (4)水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA多肽进行高效加工 (5)HSA 6.(2016·全国卷Ⅰ)某一质粒载体如图所示,外源DNA 插入Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨 苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人 将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得 的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得 到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未 被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分 别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题: (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____________________________(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述 四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基 因的细胞是不能区分的,其原因是______________; 并且____________和________________________的细 胞也是不能区分的,其原因是_____________________ ______________。在上述筛选的基础上,若要筛选含 有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有________________的固体培养基。 (3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____________。 【解析】本题考查基因工程的相关知识。 (1)质粒被选用为基因工程的载体是因为:具有一个或 多个限制酶切点;具有自我复制能力;带有
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