云南离褶伞属资源遗传多样性的RAPD分析.pdf

78 菌物学报 24卷 云南离褶伞属资源遗传多样性的RAPD分析 李林玉1 李荣春2金航1张金渝1 李绍平1 2云南农业大学食用菌研究所 昆明 650201) (-云南省农业科学院药用植物所昆明650201 RAPD技术进行云南省不同地点离褶伞属食用菌资源的遗传多样性分析，结果表明，8个引物对所有供试菌 株扩增出143条DNA片段．其中142条为多态性片段，占总扩增条带数的的99％．平均连锁聚类分析结果 以相似系数O．70为切剖点将供试菌株聚为四类，表明离褶伞属食用菌具有丰富的遗传多样性，不但具有种 间多样性还具有种内的遗传多样性。各个菌株的聚类和菌株的地理来源关系很密切。 关键词：云南离褶伞属 遗传多样性RAPD地理来源 离褶伞属(Genus cholomotaceae)真菌。云南具有得天独厚的气候和植物资源，使得在云南省境内离褶伞属真菌分布 广泛。资源丰富。在省内多数地方都有分布。各个地方部分的种属有差异，遗传多样性作为生物多 样性的重要组成部分。是物种多样性的基础。任何物种都具有其独特的基因库和遗传组成，物种的 多样性也就显示了基因的多样性(施立明，1990年)，大多数生物的自然群体具有大量的遗传变异， 在进化研究中。了解群体(或物种)内和群体间遗传变异的范围以及认识哪一种变异是形成新种的 主要因素是十分重要的(高莉萍，吕宝忠。钟扬，赵寿元，2002年)。遗传多样性的研究有益于真菌种 质资源的鉴定和保存。真菌起源与进化关系的深入研究及杂交亲本的选择等。BAPD技术被广泛用 GFet et 于菌种鉴定(Yuan al，1995年；Candeboeufal，1997年；陈作红等，2000年)。本试验利用 RAPD技术进行云南离褶伞属种质资源遗传多样性评价。探讨各个菌株问的遗传相关性及其与菌 株的地理来源的相关性，建立一套准确、快速、简便的菌种鉴定方法，为离褶伞屑食用菌的有效利 用和持续发展提供理论依据。 1材料与方法 1．1供试材料 本研究所有的供试菌株均由笔者从云南各地采集来的野生菌株，是我省的主要野生离褶伞属食用菌。 PDA综合培养基组织分离后在云南农业大学食用茵研究保存。菌株产地见表1。 表l供试菌株 Table1 Strainsofthis used study 菌株编号 产地 菌株编号 产地 No．SofSuain origin No．SofStrain origin Ly001 宾川县Ly019下关市 Ly004 剑川县Ly020楚雄双柏县 楚雄双柏县 Ly009 安宁县Ly022 Ly010 保山市Ly026景谷县 Ly011 小中旬Ly027禄劝县 Ly012 中旬县Ly028临沧地区 Ly014 丽江团山Ly029 石林县 Ly015 丽江九河LF030 富民县 Ly016 宾川县Ly031禄劝县 Ly017 宾川县Ly032禄劝县 Ly018 宾川县Lyl00大理市 24卷 李林玉等：云南离褶伞属资源遗传多样性的RAP／)分析 79 1．2 DNA提取 收集茵丝用无菌水冲洗2-3次，将菌丝表面上的水分用吸水纸滤干，准确称取菌丝体0．39，迅速在液